免疫室检测项目操作指南.doc

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1、免疫室检测项目操作指南两对半（含HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）1：取出试剂盒，室温下复温半小时，清点标本数量，从试剂盒中取出对应数量（含阴、阳对照及空白和质控）板条排好。2：每批次检查设阴阳对照各一孔，对应阴阳对照各50ul，其余孔按顺序加入血清样本50ul，依次加入酶标工作液每孔50ul（注意：HBcAb应稀释30倍后加入，即1.5ml的生理盐水加入50ul的原倍血清）3:混匀后放置水浴箱孵育30分钟，洗板6次，拍干，加入底物缓冲液、底物液各50ul，混匀后放水浴箱15分钟显色。4：加入终止液50ul，上机读取结果。表面抗原1：取出试剂盒，室温下复温半小时，清点标本数量

2、，从试剂盒中取出对应数量（含阴、阳对照及空白和质控）板条排好。2：预先在孔内加入25ul稀释液，每批次检查设阴阳对照各一孔，每孔对应阴阳对照各75ul，其余孔按顺序加入血清样本75ul。3：混匀放置水浴箱孵育60分钟，取出后直接加入酶标工作液50ul，混匀继续水浴30分钟，然后洗板6次，拍干。4：各孔加入底物缓冲液、底物液各50ul，混匀后放水浴箱30分钟显色，最后加入终止液，上机读取结果。HIV、梅毒、丙肝1：取出试剂盒，室温下复温半小时，清点标本数量，从试剂盒中取出对应数量（含阴、阳对照及空白和质控）板条排好。2：丙肝各孔预先加入稀释液100ul，再加入血清样本10ul，阴阳对照孔不需

3、要加稀释液，直接加入阴阳对照各100ul。梅毒和HIV每孔加入对应的样本或对照各50ul。3：混匀后水浴60分钟，取出洗板6次，拍干，丙肝加入100ul酶标工作液，梅毒和HIV各加入对应酶标工作液50ul，混匀继续水浴30分钟，取出洗板6次，拍干。4：分别加入底物缓冲液、底物液各50ul，混匀显色30分钟，加入50ul终止液，上机读取结果。EB病毒二项1：取出试剂盒，室温下复温半小时，清点标本数量，从试剂盒中取出对应数量（含阴、阳对照及空白和质控）板条排好。2：每孔加入血清稀释液100ul（阴阳对照不需要），然后加入血清样本10ul，阴阳对照各100ul，混匀水浴后放置30分钟，取出洗板5

4、次拍干，各孔加入酶标工作液50ul，混匀继续水浴30分钟。3：取出洗板5次拍干，先后加入底物、显色剂各50ul，显色15分钟，判断结果。优生十项1：取出试剂盒，室温下复温半小时，清点标本数量，从试剂盒中取出对应数量（含阴、阳对照及空白和质控）板条排好。2：各孔分别加入对应的血清稀释液100ul（阴阳对照不加）,然后加入血清样本10ul，阴阳对照100ul。3：混匀后水浴45分钟，取出洗板5次，拍干，各孔加入对应的酶标工作液，继续水浴45分钟，取出洗板，拍干。4：加入底物、显色剂各50ul，37℃显色15分钟，判断结果并报告。TPPA(梅毒确证实验)1：准备好反应板，取出试剂盒，室温复温半小

5、时。2：操作流程如下表所示：血清稀释液孔1孔2孔3（阴性对照）孔4（判断结果）100ul25ul25ul25ul血清25ul25ul(前一孔)25ul(前一孔)25ul(前一孔)未致敏颗粒无无25ul无致敏颗粒无无无25ul最终稀释倍数1：51：101：401：803：操作过程中，血清与稀释液混匀要彻底，倍比稀释过程也要注意混匀，加样枪应来回吸吹20次以上，孔4血清稀释完后吸出25ul弃去。4：判断结果：加样完毕后，在室温下避光放置2小时后判断结果，注意放置过程切勿晃动反应板。判读结果时应取白色背景，方便识读。若阴性对照孔的结果出现阳性，此次试验无效，应查找原因从做。