课题3 分解纤维素的微生物的分离 (4).pptx

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1、人教版选修1专题2微生物的培养与应用课题3分解纤维素的微生物的分离你认为什么是纤维素?纤维素纤维素酶组成分布作用由葡萄糖相连而成的高分子化合物植物的根、茎、叶等器官,木材、作物秸秆等与果胶构成植物的细胞壁,用于纺织业、造纸业,食品中的膳食纤维具有通便清扫的作用一.纤维素和纤维素酶那么,我们如何将纤维素分解为生物乙醇呢?纤维素生物燃料:最有希望替代石油能源科学家正致力于研究,怎样将农业废弃物、木材及生长更为迅速的草本植物,转化为种类繁多的生物燃料,比如:生物乙醇。能分解纤维素的微生物,有各种细菌、真菌和少数放线菌。纤维素纤维素酶组成分布作用C1酶、CX酶葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖纤

2、维素由葡萄糖相连而成的高分子化合物由C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶组成的复合酶植物的根、茎、叶等器官,木材、作物秸秆等某些微生物与果胶构成植物的细胞壁,用于纺织业、造纸业,食品中的膳食纤维具有通便清扫的作用纤维素酶能水解纤维素,一.纤维素和纤维素酶①取二支20mL的试管小实验:纤维素酶分解纤维素的实验②各加入一张滤纸条③分别加入pH4.8,物质量为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液11ml和10ml甲乙④在乙试管中加入1mL纤维素酶⑤两支试管固定在锥形瓶中,放在140r/min的摇床上振荡1h⑥结果:乙试管的滤纸条消失讨论1:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是什么?讨论2

3、:如何验证纤维素酶分解纤维素产生的是葡萄糖?二.纤维素分解菌的筛选1.纤维素分解菌的筛选方法2.纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法:这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落三、实验操作土壤取样选择培养操作方法:将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下振荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释梯度稀释按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行

4、等比稀释,稀释最大倍数到106三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1、制备培养基:参照旁栏中的比例2、涂布平板:   将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养培养基组成分提供的主要营养物质CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生长因子KH2PO40.25g无机盐土豆汁100mL碳源琼脂15g凝固剂上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL水鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠)三、实验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基

5、上挑选产生透明圈的菌落挑选产生透明圈的菌落参照课本刚果红染色法,挑取产生明显的透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。刚果红染色法方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应方法二:在倒平板时就加入刚果红◎方法一加入中NaCl溶液的作用?漂洗作用,洗去与纤维素结合不牢的刚果红,以免出现的透明圈不够清晰。〖思考2〗〖思考1〗◎这两种方法各有哪些优点与不足?染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用1、操作繁琐2、刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便,不存在菌落混杂问题1.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈2.有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。四、课题延伸本

6、课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选,但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结下列生物能分解纤维素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C练一练:练一练:2、下列关于纤维素酶的说法,错误的是A.纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B.

7、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖D3、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是A.刚果红能与纤维素形成红色复合物B.刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C.刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D.若培养基上产生了透明圈,则说明已筛  选出了纤维素分解菌B4、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌,符合下列哪一生物学观点?A、生物结构与功能相适应的观点B、生物结构与功能整体性观点C、生物与环境相适应的观点D、生物发展进化的观

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