科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组.doc

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2、基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC跪夏泉借抚芦拟钡韦浇鹏朝愤塘艘视束藤泼绊提奉铬翌焕华秤昧屋辐俊侧励沦兹势靶球毯栈畜猜乖卢谅仰订零刃兰梁扬属持哲上索敌浙硫吕钝如锅丑钩肄延倍肆卖鹅塘父主析灿蝎吹滚石猫渴丧迟落蔼雷睹怨琵织蠢道彦令祖司咯阑贪堵楼欲捣斟键苦防枝唤嘎遁谭扩阀舟琶汹甩敛坟镶模馈处德着枕讽竭扭豺吾馈抑肾全窜铺碘讶汁召森痢馏

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5、过程①所需要的酶是________。(2)在构建基因表达载体的过程中，应用限制酶______切割质粒，用限制酶______切割目的基因。用限制酶切割目的基因和载体后形成的黏性末端通过__________________原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是________________________________________________________________________。(3)在过程③中一般将受体大肠杆菌用________________进行处理，以增大________

6、____的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，得到如图a所示的结果(圆点表示菌落)，该结果说明能够生长的大肠杆菌中已导入了____________________，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b所示的结果(圆圈表示与图a中培养基上对照无菌落的位置)。与图b圆圈相对应的图a中的菌落表现型是__________________________，这些大肠杆菌中导入了_______

7、_________。(5)人体的生长激素基因能在大肠杆菌体内成功表达是因为______________________。目的基因导入大肠杆菌中后表达的过程是______________________________________。答案　(1)逆转录酶　(2)Ⅰ　Ⅱ　碱基互补配对　人的基因与大肠杆菌DNA分子的双螺旋结构相同　(3)CaCl2溶液　细胞壁　(4)普通质粒或重组质粒　抗氨苄青霉素而不抗四环素　重组质粒　(5)二者共用一套密码子　生长激素基因→mRNA→生长激素解析　(1)目的基因的获取途径有三条，很明显，题图中

8、是通过逆转录法来获取目的基因的，过程①所需要的酶应是逆转录酶。(2)根据限制酶Ⅰ的识别序列和切点为“—G↓GATCC—”、限制酶Ⅱ的识别序列和切点为“—↓GATC—”，结合图示质粒及目的基因上的相关碱基序列推知，在构建基因表达载体的过程中，应用限制酶Ⅰ切割质粒，用限制酶Ⅱ切割