动物分子生物学question.pptx

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1、（6）DNA双螺旋结构的多态性右手双股螺旋，细胞内最稳定、最常见的构象，92%湿度，直径2.0nm，螺距10圈，大沟较深，很宽，小沟深窄右手双股螺旋，存在于脱水DNA，DNA-RNA杂交分子，双链RNA，湿度75%以下，直径2.55nm，螺距11圈，大沟深窄，小沟宽浅湿度、盐浓度、离子种类的影响左手双股螺旋，直径1.8nm，螺距12圈，大沟平坦，小沟很深较窄。存在于天然DNA的特殊区域中，与基因的表达调控有关小沟大沟小沟大沟B-DNAA-DNAZ-DNA分光光度计在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性或定量分析。

2、波长范围为400~760nm的可见光区和波长范围为200~400nm的紫外光区。入射光=反射光+分散光+吸收光+透过光A260nm：核酸在260nm的紫外光下具有特征吸收峰。A280nm：蛋白质在280nm的紫外光下具有特征吸收峰。A260/A280的比值，用于评估样品的纯度：纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质A260nm=1，50ug/ml双螺旋DNA，40ug/ml单链DNA增色效应：核酸变性以后，在260nm处的吸收值上升的现象。DNA分子中碱基间电子的相互

3、作用是紫外吸收的结构基础，但双螺旋结构有序堆积的碱基又"束缚"了这种作用。DNA变性后DNA双螺旋解开，于是碱基外露，碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收，故而产生增色效应。减色效应：核酸复性以后，在260nm处的吸收值下降的现象。DNA的均一性：1）指DNA分子中碱基组成的均一性,如人工合成的只含有一种碱基对的多核苷酸片段,与天然DNA比较,其Tm值范围就较窄。因前者在变性时的氢链断裂几乎可"齐同"进行,故所要求的变性温度更趋于一致。2）指含有待测样品DNA的组成是否均一的意思,如样品中只含有一种病毒DNA,其Tm值范围较窄,若

4、混杂有其它来源的DNA,则Tm值范围较宽。其原因显然也与DNA的碱基组成有关。DNA聚合酶α和δ是细胞核染色体复制的主要参与酶。DNA聚合酶α为多亚基酶，其中一个亚基具有引物酶活性，并具有合成DNA的活性，但持续合成能力低。DNA聚合酶δ具有很强的DNA合成能力。DNA聚合酶β：主要作用是修复核内DNA。DNA聚合酶γ：存在于线粒体内，负责催化线粒体DNA的复制。DNA聚合酶ε：相当于原核生物内的聚合酶I，是一种修复酶，参与DNA的修补合成。真核生物的DNA聚合酶：DNA聚合酶α、δ、β、γ、ε切口平移（nicktranslati

5、on）：切口产生3’-OH和5’磷酸基团，DNA延伸合成3’端，5’端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3’端移动。是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。3’-OH3’3’3’3’5’5’5’5’3’3’5’5’3’-OH5’-P染色体末端的复制（端粒酶的工作原理）复制泡：这是DNA双向复制的方式。在复制启动时,尚未解开螺旋的亲代双链DNA同新合成的两条子代双链DNA的交界处,就称为复制叉。两个靠得很近的复制叉之间形成的空间称为“复制泡”。转录泡：是由RNA聚合酶核心酶、DNA模板链以及转录形成的RNA新链三者结合形成的转

6、录复合物。在转录的延伸阶段，RNA聚合酶使DNA双螺旋解链，暴露出长度约为17bp的局部单链区，因外形酷似泡状结构故称之为转录泡。