脑神经康复的新希望.docx

《脑神经康复的新希望.docx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、脑神经康复的新希望（重组AAV2/NAP，AAV2/Tβ4滴鼻护脑治疗技术介绍）1.脑神经保护短肽（NAP）和胸腺素β4（Tβ4）简介：a)NAP将在脑神经康复和老年痴呆治疗中发挥重要作用：i.活性依赖性神经保护蛋白ADNP（ActivityDependentNeuroprotectivePeptide）是1999年人们在研究ADNF的免疫活性时发现一种鼠的具有与ADNF免疫同源性的蛋白质，同ADNF一样，ADNP也是一种由VIP刺激胶质细胞分泌的神经营养素。同时还证实了ADNP上的一段8肽NAP(NAPVSIPQ)具有很强的生物学活性。ii.在混有神经胶质细胞的培养

2、基里NAP在小于1fMol的水平即可保护神经元对抗由河豚毒素，β淀粉样肽，NMDA以及GP120等的细胞毒害作用。iii.与ADNF-9相比NAP在体外能更有效的维持乙酰胆碱转移酶活性(Bassan等)，给ApoE缺陷型小鼠从出生起每天注射NAP，能够提高其需求反射，并能阻止短期记忆缺失。NAP注射14天的ApoE缺陷型小鼠脑内ChAT活性升高，并与正常C57B6小鼠无明显差别。iv.NAP在小鼠闭合性脑损伤模型中亦起到了神经保护作用，受伤后给小鼠注射NAP可以降低死亡率近50%，NSS评分也证明实验组神经功能恢复较快。NAP可减少损伤组织周边水肿。b)Tβ4可刺激中

3、枢神经系统干细胞的成熟，显著改善神经学功能：i.胸腺素(Thymosins)是由胸腺产生的一种淋巴生长因子，由Goldstein和White于1966年首次从胎牛胸腺蛋白提取液中发现，是一组小分子多肽，胸腺素根据等电点不同可分为α、β、γ三类，其中等电点位于5．0～7．0的为β族胸腺素(β-thymosins，Tβ)。Tβ含40～44个氨基酸，迄今已发现的Tβ成员有15个，人体内有3种，即Tβ4、Tβ10和Tβ15。其中，胸腺素B4分布最广泛、含量最多，占β族胸腺素总量的70-80％。ii.近年来，Tβ4的生物学功能倍受人们关注，它在许多生理和病理活动中起重要作用。研

4、究证明，Tβ4具有多重生物学功能，与组织再生、重塑、创伤愈合、维持肌动蛋白平衡、肿瘤发病与转移、细胞凋亡、炎症、血管生成、毛囊发育、角膜及心肌修复等密切相关。目前已经成为药物开发的国际热点。2.活性生物短肽临床使用技术瓶颈a)肽的某些重要生物学活性需要其亲体蛋白（即与肽相关的蛋白）的参与，例如胞内的生物合成，抗降解，穿越细胞膜，分泌表达，靶细胞的锚定及核定位等。b)目前的肽类药物均为体外合成，并经过多次纯化，已经完全脱离了胞内生物合成程序，也没有亲体蛋白的参与，因此丧失了与亲体蛋白相关的功能。c)临床应用表现出这些功能丧失后的缺陷，如半衰期短（有时仅为数分钟），只能以

5、弥散方式进入细胞（效率低，体内浓度要求高），不能靶向性的到达有效作用部位，生物学效应大大下降。d)由于生物学效应的下降，只能大量，连续应用才可能收效。但长期大剂量应用又有以下问题：i.小分子肽不适于体外大量生产。ii.大剂量外源性物质进入体内其所可能产生的不良反应是不可预料的。3.重组AAV2/NAP，AAV2/Tβ4滴鼻护脑治疗技术突破以上瓶颈，临床治疗获突破a)采用活性肽体内表达技术—体内分泌表达人工编码i.解决分泌表达的要点——分泌前肽ii.抗细胞内肽酶降解（大于100aa）iii.分泌表达功能前肽（利用细胞分泌表达机制）iv.确保功能肽的结构与功能（正确切割信

6、号肽）v.持续高效表达（是同类技术的15-20倍）b)技术安全性i.采用国际公认的安全性载体设计1.未使用生殖细胞，未改变人类的遗传物质。2.未使用整合宿主细胞DNA的病毒载体。3.未使用复制性病毒载体。ii.目的功能肽的安全性1.来源于体内蛋白质，属于内源性物质。2.功能肽作用精确，避免对无关（或正常）细胞的影响。3.具有自然半衰期，避免在体内长期存留。4.目的功能肽的筛选原则：对异常细胞有效；对正常细胞无害。iii.大量国际文献支撑的安全性研究资料2.重组AAV2/NAP，AAV2/Tβ4治疗技术优势a)将具有广泛治疗前景的小分子功能肽的临床治疗由憧憬变成现实i.

7、首次实现NAP的实用化治疗，发挥其对神经细胞的营养、保护、再生和功能恢复的功效。b)安全性极高i.外用给药ii.病毒载体只感染鼻黏膜细胞，不入脑iii.分泌肽为人源性NAP和Tβ4，不产生相容性等问题c)疗效独特i.延缓、阻止老年痴呆的发展ii.提高脑中风后脑神经康复程度iii.缩短脑神经康复时间iv.预防老年痴呆的发生d)给药途径简单、可靠i.采用滴鼻给药途径，就能使NAP入脑，产生治疗效果ii.避免了这类短肽治疗需要脑室注射的各种风险产生iii.患者在家就可以自行治疗e)疗程维持时间长i.由于本治疗的疗效维持时间是与感染的宿主细胞存活周期密切相关