尿素测定方法.doc

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1、实验十七实验名称：尿素的测定实验目的与要求：掌握测定血清尿素的基本原理实验仪器、试剂：半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒实验原理：尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶（GLDH）的作用下，氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ（NADH）反应生成谷氨酸和NAD+，NADH在340nm处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。操作方法：1、将试剂R1：R2=4：1混合，即为工作液2、按下列顺序加入各试剂单位ml空白标准样本蒸馏水0.01——样本－－0.01标准液－0.01－工作液1.01.0

2、1.03、混匀各管，340nm,空白管调零，延时30秒，读取初始吸光度A1，60秒后读取A2，计算ΔA实验现象与数据：记录ΔA结果分析与结论：尿素＝ΔA样/ΔA标×C标（8.32mmol/l）参考范围：1.7-8.3mmol/l临床意义：实验十八实验名称：血清尿酸的测定实验目的与要求：掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理实验仪器、试剂：尿酸测定试剂盒，722E/723分光光度计实验原理：尿酸酶氧化尿酸，生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使ESBmT和4－氨基安替比林缩合成

3、有色化合物，其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。操作方法：按以下步骤操作单位ml标准测定空白样本－0.025－标准液0.025－－蒸馏水－－0.025酶试剂1.01.01.0混匀37℃温浴5min，以空白管调零。546nm，0.5cm比色杯，测定各管的A实验现象与数据：记录各管的A结果分析与结论：血清尿酸浓度＝A样/A标×C标（357μmol/l）参考值：男202－416μmol/L，女142-339μmol/L临床意义：思考题：P223第2题