DB22∕T 2800-2017 玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范.pdf

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1、ICS65.020B05备案号：59164-2018DB22吉林省地方标准本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2800—2017玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范本标准仅供内部使用不得翻印TechnicalspecificationforresistanceevaluationofExserohilumturcicumtofungicides2017-12-11发布2018-04-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2800—2017本标准仅供内

2、部使用不得翻印前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林大学。本标准主要起草人：张祥辉、王岩、潘洪玉、张艳华、刘金亮、杨正宇、司乃国、许矛。本标准仅供内部使用不得翻印I本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2800—2017本标准仅供内部使用不得翻印玉米大斑病菌对杀菌剂抗药性评价技术规范1范围本标准规定了玉米大斑病菌对杀菌剂敏感性测定、敏感基线建立、抗药性评价和待测菌株抗性水平评估。本标准适用于玉米大斑病菌对吡唑醚菌酯

3、、咪鲜胺和嘧菌酯抗药性评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1玉米大斑病菌fungusofNortherncornleafblight凸脐蠕孢菌（Exserohilumturcicum）。2.2杀菌剂抗药性resistancetofungicide对农药敏感的野生型植物病原物个体或群体，由于遗传变异而对药剂出现敏感性下降的现象。本标准仅供内部使用不得翻印2.3有效中浓度effectiveconcentration(EC50)抑制50%病菌菌丝生长或孢子萌发时的杀菌剂浓度。2.4菌丝生长抑制率inhi

4、bitoryrateofmyceliumgrowth杀菌剂对靶标生物菌落生长抑制效率。3杀菌剂敏感性测定3.1测定方法3.1.1供试菌株在未施用过吡唑醚菌酯、咪鲜胺和嘧菌酯类杀菌剂的地区，采集病样，通过单孢分离纯化获得至少50株玉米大斑病菌株，保存在PDA培养基中，置于4℃冰箱，备用。3.1.2供试药剂3.1.2.1吡唑醚菌酯标准品（98.5%）、咪鲜胺标准品（98%）、啶菌恶唑标准品（95%），三种杀菌剂标准品均用分析纯丙酮进行溶解。3.1.2.2PDA培养基（见附录A）。3.1.2.3无菌水。3.1.3杀菌

5、剂药液配制1DB22/T2800—2017将杀菌剂标准品用相应的溶剂溶解，并用无菌水稀释，加入到PDA培养基中，制成含有系列质量浓度的PDA培养基，培养基中溶剂含量应低于0.1%。3.1.4生长速率法测定本标准仅供内部使用不得翻印将培养好的玉米大斑病菌，用直径为5mm灭菌打孔器打成菌饼，置于含有杀菌剂的PDA培养基平板中，每个培养皿中一个菌饼，另设不含药剂的PDA培养基与只含等量溶剂PDA培养基为对照，于25℃恒温培养箱中培养7d，重复3次。采用十字交叉法测量各处理的菌落直径。3.2计算方法按公式（1）、（2）

6、计算药剂对菌丝的生长抑制率，采用最小二乘法建立毒力回归方程，计算相关系数和药剂的有效中浓度（EC50），按照附录B.1记录试验结果。DDD......................................(1)12式中：D——菌落增长直径D——菌落直径1D——菌饼直径2本标准仅供内部使用不得翻印D0D1I100...................................(2)D0式中：I——菌落生长抑制率D——空白对照菌落增长直径0D——药剂处理菌落增长直径14敏感基线的建立利用供

7、试菌株的EC50值制作敏感性频率分布图，确定是否符合正态性分布。若符合正态分布，供试菌株的EC50平均值作为玉米大斑病对杀菌剂的敏感基线；若不符合正态分布，出现双峰情况，证明供试菌株中已出现抗性菌株，应剔除，重新建立敏感基线。5抗药性评价建立待测菌株对杀菌剂的抗药性判定标准。2DB22/T2800—2017表1待测菌株抗药性水平判定标准抗性指数RF（供试菌株EC50值/敏感基线的EC50值）本标准仅供内部使用不得翻印抗性水平抗性菌株吡唑醚菌酯吡唑醚菌酯咪鲜胺啶菌恶唑敏感菌株≤5≤5≤5S低抗菌株5＜RF≤105

8、＜RF≤105＜RF≤10LR中抗菌株10＜RF≤4010＜RF≤10010＜RF≤40MR高抗菌株＞40>100＞40HR注1：S——敏感;注2：LR——抵抗;注3：MR——中抗;注4：HR——高抗。6待测菌株抗性水平评估本标准仅供内部使用不得翻印根据待测菌株的EC50值，计算抗药性比值，评价待测菌株的抗药性水平。同时调查菌株采集地的病害防治的药剂施用历史（见附录B.2）。3DB22