紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用.doc

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1、紫外可见分光光度法在抗生素类药物分析中的应用综述了近年来紫外可见分光光度法在抗生素药物分析中的应用,其中包括内酰胺类、氨基糖苷类四环素类、大环内酯类、喹诺酮类抗生素;并展望了该方法今后的发展趋势。自1940年青霉素应用于临床以来,已发现的抗生素种类达千余种,临床中常用的亦有上百种。据报道,在欧美等发达国家,抗生素的使用量占到所有药品的10%左右;而在我国医院的使用量普遍在30%~50%之间。畜牧业、渔业中使用的抗生素更多,其用量远远超过人类各种抗生素使用量的总和。准确测定生产过程及临床应用的抗生素含量,对合理使用抗生素具有重要意义。紫

2、外可见分光光度法因分析手续简便,仪器简单,无需高价维护,能满足常规检测需要,在抗生素分析中被普遍使用。近几年来,借助紫外可见分光光度法研究抗生素的论文就有上百篇,本文就这一时期的有关报道进行简要评述。1抗生素的常见分析方法在抗生素分析检测中,目前常用的方法有微生物检定法、质谱法(MS)及色谱法(包括薄层色谱TLC、高效液相色谱HPLC、气相色谱GC、毛细管电色谱CEC)等。微生物检定法元需对抗生素多种活性成分进行分离,可体现药品的医疗价值,但是也存在步骤繁琐、成本高、误差大等缺点。色谱法,先分离后检测,具有灵敏、准确,分析速度快等优点

3、,与MS法联用还可提高选择性和灵敏度。但是,HPLC、GC、MS等仪器昂贵,设备维护费高,极大地限制了其普及。紫外可见分光光度法恰恰在经济、实用方面弥补了大型仪器方法的不足;其仪器简单,无需高价维护,分析手续简便,能满足纯药品常规分析的需要,因而在高等院校、医院、药厂等基层单位,UV光度计的使用率远高于色谱法和生检法。2紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法是基于分子内电子跃迁而建立起来的一种光谱分析方法。其中Л—Л,P—Л共轭体系的电子跃迁较有实用价值,前者能产生较强吸收峰,后者往往具有增色作用。紫外可见光度法定量分析的基础是朗伯——

4、比尔定律:A=cbc。经过半个世纪的发展,紫外可见光度法已经形成了一些比较成熟的测定方法,如普通光度法常以蒸馏水为参比无需显色剂,在最大吸收下直接测定;显色光度法是利用被测物与显色剂的显色反应,以试剂空白或样品空白为参比,在显色波长下进行测定;如果测定波长选择显色剂的褪色波长,则称为褪色法。对于多组分样品,由于总吸收为各组分吸收的总和,如于两波长分别测定后,建立方程组,可同时测得2个组分的含量,此为双波长法。对于吸收出现肩峰的情况可先对吸收曲线进行求导处理,再选择峰值为测量点,此为导数法。其它常用的方法还有双光束法、示差法、等吸收法等

5、。3抗生素类药物的结构与光谱吸收不同作者对抗生素的分类方法有所不同,顾觉奋[1]将抗生素分为5大类:(1)内酰胺类;(2)氨基糖苷类;(3)四环素类;(4)大环内酯类;(5)其它类。本文依据此分类,并将近年研究较多的喹诺酮类抗生素单独列为一类,简述抗生素的结构及紫外吸收特征。3.1β—内酰胺类抗生素分子含有β—内酰胺环结构,如图1所示。β—内酰胺环状Л—Л*吸收在200nm以下,当侧链含有其它显色或助色基团时,可在200nm以上产生吸收。临床应用中绝大多数β—内酰胺类抗生素都有紫外吸收。3.2氨基糖苷类抗生素氨基环醇与氨基糖缩合而成的

6、苷,其特点是一般不含Л—Л共轭体系,但含多个羟基和氨基;易溶于水,易形成配合物,可用显色法进行测定。常用的显色剂有Fe3+离子、依文思蓝、曲利本红、曲利本蓝、滂胺天蓝等。3.3四环素类抗生素以四并苯环为母核,基本结构如图3所示,含有苯环,且环外—C=O使共轭体系增长。通常在210~250nm有K带强吸收,在260~300nm有B带强吸收或由Ar—C=O共轭引起的强吸收,可直接进行测定。3.4大环内酯类抗生素以1个大环内酯为母体,通过羟基,以苷键1~3个分子的糖相联结,多数大环内酯抗生素在200~300nm之间有紫外吸收峰,可直接进行测

7、定。由于分子常为多羟基结构,因而也常利用显色法测定。4紫外可见分光光度法的应用4.1β—内酰胺类抗生素β—内酰胺类抗生素的吸收往往无其它干扰,可不经显色直接测定含量。李燕航等在这方面做了一些研究工作,他们用普通法直接测定了头孢地尼3、头孢氨苄;用示差法测定了孢羟氨苄;用一阶导数法测定了头孢拉定。β—内酰胺类抗生素也可用显色光度法进行测定,杜黎明等对此进行了一系列研究,他们以四氰基对苯醌为显色剂,分别测定了头孢克洛和头孢噻吩;以硫酸铁铵为显色剂测定了头孢曲松钠,以苯基荧光酮为显色剂测定了头孢哌酮钠。紫外可见分光光度法还可用于临床配伍药物

8、。如李锦璨等在272nm处考察了注射用头孢米诺钠在5种不同输注液中的稳定性,黄红瑞等在274nm处研究了头孢呋辛钠注射液与氨茶碱、鱼腥草2种注射液的配伍稳定性。4.2氨基糖苷类抗生素该类抗生素数量种类较多,包括链霉素、庆

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