转哺乳动物cyp2el基因烟草植株再生及其分析.pdf

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1、MASTERDISSERTATIoNTransgenicplantregenerationoftobacco(Nicotianatabacum)haboringmammaliancyp2elgeneanditsanalysisByLiPeihanSupervisorProf．XiangTaihe’CollegeofLifeandEnvironmentSciencesHangzhouNormalUniversityHangzhou，China莹嗑塾边堑业丝曼兰基因坦堇擅挂论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4．评阅人5：答辩委员会主席

2、：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：答辩日期：杭州师范大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得揎刿墟整盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解揎趟娅整盘鲎有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权揎趔

3、娅整盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日杭州师范大学硕士学位论文致谢转眼间三年的研究生生活即将接近尾声，在学业完成之际，我要向三年来给予我关心和帮助的每一位老师和同学表示感谢。首先，我要衷心感谢我的指导老师向太和教授!本论文是在向老师的悉心指导和大力支持下完成的。无论是在论文的选题构思、资料的收集，还是论文的研究方法以及成文定稿，我都得到了向老师耐心细致的指导和无私的帮助，特别是他广博的

4、学识、深厚的学术素养、严谨的治学态度和一丝不苟的工作作风使我受益终身。在我撰写论文的过程中，向老师倾注了大量的心血；在生活上，向老师也给了我很多建议和指导，为我今后的人生指明了方向。值此论文完成之际，谨向向老师表示崇高的敬意和真诚的感谢并祝愿向老师在学术领域取得更大的成就，培育更多的人才。其次，我要感谢庞基良教授在植物组织培养方面的指导，感谢王利琳教授、胡江琴副教授、金孝锋副教授、陈哲皓老师等在专业课学习上的指导。感谢王慧中教授开放分子生物学实验室为我实验的顺利进行提供了帮助，感谢各位老师在我的学>--j和生活中给予的鼓励和支持。我还要特别感谢我的同门张道祥、孟莎

5、莎、曹庆丰、杜苏瑞和王沙沙在实验和生活上对我的关心和帮助，感谢我的好朋友沈少华、杨洁、黄瑞建、赵红燕、陈博、李颖、王珍华、鲍林文、韩雪等对我无私的帮助和支持，感谢二楼实验室的兄弟姐妹们热忱的帮助，感谢我的室友卢增兰、刘守梅和吴庆玲对我生活上的照顾。是你们带给我欢乐，带给我感动，陪伴我度过了这段美好难忘的时光，真诚的谢谢你们!最后，我要感谢生我养我的父母，正是您们的辛勤劳动与付出才为我提供了如此美好的学>--j机会，感谢你们对我无微不至的关怀和包容。焉得谖草，言树之背，养育之恩，无以回报，祝愿你们永远健康快乐!再一次感谢我的导师，感谢这三年中帮助过我的老师、同学和朋

6、友，感谢你们相伴，希望你们在今后的生活中，工作顺利，事业有成，家庭幸福美满!李佩菡2012年3月31日于杭州杭州师范大学硕士学位论文摘要哺乳动物肝细胞cyp2e1基因所编码的蛋白CYP2E1在代谢异型有机物方面起着重要作用，转cyp2el基因植物能够高效分解苯、甲苯、三氯乙烯、三氯甲烷、四氯化碳和二氯乙烯等有机污染物。在哺乳动物体内，CYP2E1酶受到乙醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯、甲苯、甲醛、吡唑和异烟肼等因子的诱导；缺氧等环境因素也可以诱导cyp2el基因的表达；而且，从代谢途径看，在CYP2E1酶对异型有机物的代谢过程中，NADPH—P450氧化还原酶和细胞色

7、素(cytochrome)b5参与CYP2E1酶催化过程的电子传递链，但cyp2el基因在转基因植物体内的表达调控和代谢机理尚不清楚。本研究首先利用根癌农杆菌转基因技术成功地将cyp2el基因转入烟草，分析了外源基cyp2el在转基因烟草中的表达以及外源基因在后代中的分离情况，同时分析了不同环境因子对cyp2el表达的影响以及转基因烟草内源性NADPH．P450氧化还原酶和细胞色素b5的表达情况。主要研究结果如下：1．将含有cyp2el基因的质粒pSLD50-6和对Ngus基因的质粒pKH200转入根癌农杆菌GV3101，利用农杆菌转基因技术将cyp2el基因和对

8、Ngus基