木瓜蛋白酶在PEG∕PEG-IDA-Fe3﹢∕(NH4)2SO4亲和双水相中的分配系数模型.pdf

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1、第31卷2015笠第17期9月农业工程学报TransactionsoftheChineseSocietyofAgriculturalEngineeringVbl_31No．17木瓜蛋白酶在PEG／PEG．IDA．Fe3+／(NH4)2S04亲和双水相中的分配系数模型彭健，张海德※，蒋梦诗，许英豪，蔡涛，何余勤，文娜娜(海南大学食品学院，海口570228)摘要：为预测木瓜蛋白酶在PEG／PEG．IDA．Fe3+l(NIh)2s04亲和双水相中的分配行为，在298．15K条件下利用浊点法测定并比较了PEGI(NH4)2S04和PEG／PEG．IDA．Fe3+／fNn4)2S04的三角

2、相图，建立了木瓜蛋白酶在无亲和配基双水相和含亲和配基双水相中分配模型。考察双水相各组分浓度与木瓜蛋白酶在该体系中分配系数的相关度，基于酶分配系数与双水相中上下相组分浓度差之间较高相关度，提出了木瓜蛋白酶在PEG／(NH4)2s04双水相中分配系数与上下相组分浓度差的关联模型，模型相对偏差为’7．02％。引入亲和配基浓度对酶分配系数的影响因子珂，提出了木瓜蛋白酶在PEG／PEG．IDA．Fe3。7(NH)2S04亲和双水相中分配系数模型，试验验证，预测值和试验值之间相对误差均在15％以内，能实现亲和双水相中酶的准确预测。研究结果为木瓜蛋白酶在双水相中分配系数的工程计算提供参考。关键

3、词：酶；模型；萃取；亲和双水相；木瓜蛋白酶；三相图doi：10．11975巧．issn．1002-6819．2015．17．039中图分类号：0658．2文献标志码：A文章编号：1002-6819(2015)-17—0295-07彭健，张海德，蒋梦诗，许英豪，蔡涛，何余勤，文娜娜．木瓜蛋白酶在PEG／PEG-lDA-Fe3+／(NH。)：S0．亲和双水相中的分配系数模型[J]．农业工程学报，2015，31(17)：295—301．doi：10．11975巧．issn．1002—6819．2015．17．039http：／fwww．tcsae．orgPengJian，ZhangHa

4、ide，JiangMengshi，XuYinghao，CaiTao，HeYuqin，WenNana．PartitioncoemcientmodelofpapaininPEG／PEG-IDA—Fe’+／(NH4)2S04affinityaqueoustwo—phasesystem[J]．TransactionsoftheChineseSocietyofAgriculturalEngineering(TransactionsoftheCSAE)，2015，31(17)：295--301．(inChinesewithEnglishabstract)doi：10．11975／j．issn

5、．1002—6819．2015．17．039ht中：／／www．tcsae．org0引言双水相萃取法(aqueoustwo—phaseextraction)是19世纪70年代发现的的分离生物活性物质的新方法，因具有目标产物萃取率高、可连续操作、无有机溶剂残留、分离过程成本低等优点，广泛运用于生物质的分离[1卅。亲和双水相是将亲和配基引入双水相中的萃取技术，利用亲和配基与目标产物之间的特异性亲和作用，有效提高目标物质在双水相中的选择性分配，提高分离过程的效率和分离产品纯度【5】。过渡金属离子、活性染料以及小分子基团由于价格低廉、亲和效果好、化学稳定性较高等特点，作为亲和配基广泛应用

6、于双水相中[6】。近年来，采用双水相萃取蛋白酶的研究十分活跃，但大都集中在新型双水相体系的建立和萃取条件优化，对于蛋白酶在双水相中分配模型的研究报道较少，在亲和双水相中分配模型的研究更少【_7‘101。蛋白酶在双水相中分配模型相关的研究，主要是对双水相中蛋白分配系数收稿日期：2015．06—18修订日期：2015．07—20基金项目：国家自然科学基金《木瓜蛋白酶在金属螯合亲和双水相系统中的分配行为研究》(31260401)作者简介：彭健，男，江西宜春人，主要从事食品分离技术研究工作。海南海南大学食品学院，570228。Email：pengjianl9890807@163．corn

7、※通信作者：张海德，男，湖南宁远人，教授，博士，硕士生导师，研究领域：食品分离技术。海南海南大学食品学院．570228。Email．．zhanghaide@163．corn或酶活分配系数与双水相中上下组分浓度之间的关联。谢红国等⋯】通过关联蛋白分配系数与TritonX—100／(NH4)2S04双水相上下相各组分浓度差，得出碱性蛋白酶在TritonX一100／无机盐双水相中的分配模型。董安华等【12】建立了木瓜蛋白酶在PEG／(NH4)2S04双水相体系中酶活分配系数的分配模型，