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1、生物微矩阵(芯片)方法检测100例幽门螺杆菌抗体的临床分析作者单位：161000齐齐哈尔医学院第一附属医院通讯作者：田淑梅【摘要】日的生物微矩阵芯片技术检测患者血清屮幽门螺杆菌(Hp)毒素相关蛋白(CagA).空泡毒素(VacA)及尿素酶抗体(Ure),快速提供胃十二指肠疾病诊断的依据。方法对100例胃病患者留取血清，用生物微矩阵芯片方法检测。结果CagA阳性为55%,VacA阳性为29%,Ure阳性为16礼结论芯片法在幽门螺杆菌感染的诊断、筛杏和防治屮具有重要意义。【关键词】生物微矩阵芯片；幽门螺杆菌；空泡毒素；毒素相关蛋白；尿素酶胃十二指肠疾病与
2、幽门螺杆菌(HelicobacterPyloyiJIp)感染的关系密切，胃黏膜或胃液屮幽门螺杆菌的检测可作为诊断和治疗的重要依据。Hp感染呈全球性分布，与消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌及MAK淋巴瘤的发生率密切相关[1]o在我国人群中,幽门螺杆菌的感染率已达50%〜60%[2],方国家大约为30%〜50%。在屮国，其感染率的比例随年龄增长而提高。白从1983年Warren等人首次发现Hp以来，国内外关于Up的研究共快，lip现已被公认为是上消化道疾病的重要因素。芯片法检测幽门螺杆菌操作简单，样品用量少，具有快速
3、、准确、特异性高等优点。1材料和方法1.1试剂与仪器生物芯片检测仪，批号：LE-01-B,西安联尔生物技术有限公司提供。幽门螺杆菌蛋白芯片检测试剂，批号：SXA120401,由西安联尔生物技术有限公司提供。1.2标本随机收集本院2010年8月胃病患者的血淸样木100例，用生物芯片检测仪，以上标木均排除溶血和脂血。1.3方法幽门螺杆菌蛋白芯片检测步骤如下：(1)在芯片上片盒窗口内滴加4滴试剂A,使膜表曲完全浸湿；(2)待完全渗入后，室温放置1min,加待检血清100u1；(3)待血清完全渗入后，再滴加6滴试剂B；(4)待试剂B完全渗入后，滴加10滴试剂
4、C；(5)待试剂C完全渗入后,最后滴加6滴试剂D；(6)反应完毕后30min内,将芯片放入芯片阅读系统进行分析。2结果2.1在100例胃病患者中,蛋白芯片法检测出CagA阳性为55%,VacA阳性为29%,Ure阳性为16%。2.2CagA(+),VacA(+),Ure(+)三者都阳性属于I型Hp感染,毒性强，与十二指肠炎、计匸指肠溃疡及胃癌的发生密切相关，可能正处在发病期应立即检杏治疗。2.3CagA(+),VacA(-),Ure(+)或CagA(-),VacA(+),Ure(+),其屮两者阳性属于屮间型Hp感染。毒性较强，与消化性溃疡等密切相关，
5、部分功能性消化不良亦与Z相关。发病概率较大，应积极配合临床治疗，小心保养胃肠道。2.4CagA(-),VacA(-),Ure(+)属于II型Hp感染。毒性弱，主要与慢性浅表性胃炎的发生相关，可观察治疗，注意保养胃部。2.5CagA(-),VacA(+),Ure(-)或CagA(+),VacA(+),Ure(-)比例较低，人群屮较为少见，建议积极观察，定期复查。6CagA(-)，VacA(-),Ure(-),无Hp感染。3讨论1细胞毒素相关蛋白A(CytotoxinassociatedgeneA,CagA)CagA蛋白具有很强的免疫原性，能诱导宿主胃黏
6、膜局部产生多种细胞因了，尤其是IL-8,进而通过促进屮性粒细胞的聚集和活化启动炎症过程。在胃黏膜表血，所有消化道溃疡的患者和60%的功能性消化不良患者均产生CagA抗体,血清屮检测到CagA为幽门螺杆菌感染的一个高度特异性指标。CagA与幽门螺杆菌毒力呈高度相关，十二指肠溃疡患者分离的菌珠90%呈CagA阳性，而浅表性胃炎患者CagA阳性仅为50%〜60%,100例胃病患者血清屮CagA阳性55%,与文献资料相符。2.2毒素A蛋白(VacuolatingcytotoxinA,VacA)VacA阳性为29%,VacA因其可致细胞空泡变性而得名，与消化性
7、溃疡密切相关。在小鼠动物模熨屮，纯化的VacA能诱导小鼠形成胃溃疡。CagA和VacA抗体的联合检测，有利于幽门螺杆菌毒珠和非毒珠的分型，从而判断患者的感染类型和预后。3.3尿索酶(Ure)Ure阳性为16%,尿索酶是幽门螺杆菌主要抗原所有的野生型幽门螺杆菌均产生尿素酶。它可以引起虑者产生TgG和IgA,检测血清小相应抗体可作为幽门螺杆菌感染的依据之一。综上所述，幽门螺杆菌是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，与胃癌的发生密切相关[3〜5]o我国人群感染率高达50%〜80%,防治任务十分艰巨。幽门螺杆菌蛋白芯片检测系统利用基因重
8、组技术、斑点免疫渗滤技术和微阵列技术，为快速、方便、准确地检测幽门螺杆菌提供了一个科学先进的方法和手段，是幽
