实验12Vc含量的测定.ppt

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1、实验十二维生素C含量的测定提出问题：什么是维生素C？是性质的检测还是量的检测？WhatisVitaminC?VitaminC(alsocalledascorbicacid抗坏血酸)isawatersolublevitaminfoundabundantlyinmanyplants.VitaminCisessentialtogrowthinthehumanbodybecauseitisrequiredformakingcollagen胶原.However,humancannotmakeVitaminC.Ithastobeprovidedthroughdie

2、t.ThediseasethatresultsfromaseveredeficiencyinvitaminCiscalledscurvy坏血病.Peoplewithscurvygetbruises瘀伤easily.Theirskinandteethalsobecomeveryunhealthy.维生素C，又称抗坏血酸，在植物的绿色部分及许多水果、蔬菜中含量丰富，是一类对物质代谢具有重要的作用的水溶性维生素。参与氧化还原反应。（递氢体）参与体内羟化反应，Vc是羟化酶的辅酶。解毒作用维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，可分为还原型和氧化型两种形式。根据

3、它具有的还原性质可测定其含量。什么是维生素C？生理特性：参与体内羟化反应，参与氧化还原反应，促进铁吸收防止贫血，解毒作用，改善变态反应，提高免疫力，人体不能自己生产。物理特性：水溶性化学特性:强还原性维生素C的生物特性水溶性强还原性提取维生素C的水溶液通过氧化还原滴定法来测定维生素C。测定的思路DCPIPTheprincipleofthismethodisatitrationwithdichlorophenolindophenol(orphenol-indo-2:6-dichlorophenol,alsoknownasDCPIP).Ascorbicacid

4、reactswithDCPIP,changingthecolorfrombluetopinktocolorless.Theyreactina1:1fashion,soifaknownquantityofDCPIPsolutionreactswiththeplanttissueextract,thequantityofDCPIPusedgivesadirectmeasureofthequantityofascorbicacidpresent.2,6-二氯酚靛酚2,6-二氯酚靛酚23当溶液从无色转变成微红色时即表示溶液中的抗坏血酸刚刚被全部氧化，此时即为滴定终

5、点。粉红色蓝色无色DCPIP是性质的检测还是量的检测？蛋白质的性质实验蛋白质的两性反应及等电点的测定溶菌酶的提取蛋白质含量的测定蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳细菌DNA的提取UV测定DNA含量和纯度PCRDNA琼脂糖凝胶电泳酶的动力学测定血清SGPT酶活性的测定用标准品来测定样品1.学习定量测定维生素C的原理和方法。2.进一步掌握滴定法的基本操作技术。3.了解水果及蔬菜中维生素C的含量情况。【目的和要求】（一）提取称取松针2.0克(或其他水果2~10克)，剪碎，放在研钵中；【实验方法】加2%草酸5-10毫升，研磨成浆状；滤纸过滤，滤饼可用少量2%草酸洗2-3次；

6、置滤液于50mL容量瓶中,用2%草酸溶液定容并混匀。2mL标准Vc溶液（0.1mg/mL）8ml2%草酸（二）标准抗坏血酸的滴定根据所用染料的体积，计算出1ml染料相当于多少毫克(T)抗坏血酸。分别以0.1%2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色，并保持15秒不褪色，即达终点。10ml2%草酸（空白对照）2份2份（三）样品的滴定①滤液2份，每份10mL滴定方法同前。消耗DCPIP的量(ml)12均值标准Vc(0.1mg/ml)样品滤液(D)(VA)2%草酸(VB)１ml染料相当于TmgVc（四）计算VA:滴定样品提取液所用染料的平均毫升数VB:滴定空白对照所

7、用染料的平均毫升数C:样品提取液总的毫升数D:滴定时所取样品提取液的毫升数W:待测样品的重量（g）T:为1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数Vc含量（mg/100g样品）＝（VA－VB）×TD×C×100W1.整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。2.滴定所用2，6-二氯酚靛酚的量应在1-4毫升之间，超出或低于此范围，应增减样品液用量或改变提取液稀释度。【注意事项】3.微量滴定管要小心操作。【实验报告】实验标题姓名，班级，学号实验原理DCPIP(蓝色)+H+DCPIPH+(粉红色)DCPIPH+(粉红色)+VcDCPIPH2+(无色)实验方法及简单步骤

8、实验结果及计算实验报告消耗DCPIP的量(ml)12均值标准Vc(