江苏省2013年高考生物 热点预测 8.1微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用精品课件.ppt

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1、第1讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用一、微生物的基本技术1.培养基的制备计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。2.无菌技术：主要包括消毒和灭菌(1)消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。(2)常用灭菌方法：①灼烧灭菌：接种环、接种针等金属器具。②干热灭菌：主要针对玻璃器皿等。③高压蒸汽灭菌：主要针对培养基等。3.倒平板操作4.平板划线操作平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。注意划线的方法（见图）。5.涂布分离法先将菌液进行一系列梯度稀释后涂

2、布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。如图：【特别提醒】(1)制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。(2)划线分离法中的“连续划线”及涂布分离法中的“系列稀释”目的是一样的，都是为了保证菌种在培养基中单个分布(划线分离法中最后一次划线的末端)。二、微生物的分离与计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（1）筛选菌体：选择以尿素为惟一氮源的选择培养基。（2）统计菌落数目的方法：①显微镜直接计

3、数法：a.原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。b.方法：用计数板计数。c.缺点：不能区分死菌与活菌。②间接计数法（活菌计数法）：a.原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。b.操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。c.计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下

4、平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。（3）菌种鉴定：在选择培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明该种细菌能分解尿素。2.分解纤维素的微生物的分离（1）原理：即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。（2）流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。【特别提醒】（1）分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上生成。（2）平板划线法只适合用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。（

5、3）分离能分解纤维素的微生物时，有时需要进行选择培养，选择培养的目的是增大选择对象在样液中的浓度，以确保用刚果红染色法鉴别时确实能得到所需菌种。三、传统发酵技术的应用【特别提醒】（1）果酒和果醋的制作要注意温度、气体和发酵时间的控制。（2）腐乳制作中盐、酒和各种香辛料的作用有共同之处：既具有调味作用，也具有杀菌防腐的作用。【热点考向1】微生物的培养与应用高考频次3年9考预测指数☆☆☆【典题训练1】（2012·滨州模拟）下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏、蛋白胨培养基的配方。（1）培养基的类型

6、很多，但培养基中一般都含有水、碳源、____和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____。（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______两种。在接种过程中，接种环或涂布器的灭菌方法是_________。（3）假设某同学发现培养基上细菌数目过多连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因：_________________；措施：_____________________。（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现__

7、______型曲线增长。（5）该培养基_____（“能”或“不能”）用于筛选土壤中的纤维素分解菌。在筛选纤维素分解菌时，常加入的一种染料是__________，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，所以可以通过是否产生_______来筛选纤维素分解菌。【规范答题】（1）生物术语规范：平板划线法、稀释涂布平板法、稀释倍数、刚果红染液、透明圈。（2）审题规范：第（3）小题中“细菌数目过多连成一片”，说明细菌的密度过大，应与稀释倍数联系起来。第（4）

8、小题中注意培养细菌的场所是“大试管”，虽然是大试管，但空间和其中的营养液毕竟有限。【解析】（1）培养基的成分有水、无机盐、碳源和氮源等。表格中的各种成分中，牛肉膏中含C，所以该培养基中牛肉膏是碳源。（2）接种微生物的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法。接种环和涂布器属于金属器具，所以要采用灼烧灭菌的方法进行灭菌。（3）如果在培养基上细菌密度过大，说明菌液的稀释度过小，应加大稀释倍数。（4）由于试管中营养液及空间是有限的，所以大肠杆菌的增长方式应为“S”型增长。（5）