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时间:2020-03-27
《液相色谱-质谱联用法测定动物血浆中^15N标记氨基酸的同位素丰度.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第8期化学世界·475·液相色谱一质谱联用法测定动物血浆中N标记氨基酸的同位素丰度侯捷,雷雯,杜晓宁(1.上海化工研究院上海稳定性同位素T程技术研究中心,上海2000622.华东理工大学化学与分子工程学院,上海200237)摘要:建立了液相色谱一质谱联用(LC—MS)测定血浆中稳定同位素N标记的甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸和尿素同位素丰度的方法。待测动物血浆样品经丙酮提取,氮吹浓缩后,用液相色谱电喷雾质谱(LC—ESI—MS)进行检测。以乙腈和质量分数为0.2甲酸水溶液为流动相进行洗脱,经亲水色谱柱分离,在选择离子模式(SIM)下监测特定质荷比的上述四种待测物,依据测得的峰
2、强度计算每种待测物的同位素丰度。通过对已知同位素丰度的甘氨酸一N、谷氨酸一N、天冬氨酸一N和尿素一N。进行验证,相对偏差在0.7%以内。方法具有样品前处理简单、检测耗时少、表征结果准确,一次进样可同时测定血浆中稳定同位素标记甘氨酸一N、谷氨酸一N、天冬氨酸一N和尿素N的同位素丰度等优点。关键词:N一氨基酸;同位素丰度;液相色谱一质谱联用中图分类号:0657.63;TQ126.2文献标志码:A文章编号:0367~6358(2016)08—0475—06IsotopeAbundanceCharacterizationofN—LabeledAminoAcidsinAnimal
3、PlasmabyLiquidChromatography—MassSpectrometryHOUJie。LEIWen~,DUXiao—ning(1.InstituteoJShanghaiChemical,EngineeringandTechnologyResearchCenterofStableIsotope,Shanghai200062,China;—2.EastChinaUniversityofScienceandTechnology,CollegeofChemistryandMolecularEngineering,Shanghai200237,China)Abs
4、tract:Aliquidchromatography—massspectrometry(LC—MS)methodwasdevelopedforthedetermina~tionofisotopicabundanceofglutamicacid一N,glycine一。N,asparticacid一Nandurea一N2.Thebloodsamplewasextractedwithacetonetogettheproteins.ThecompoundwasseparatedonCosmosilHiliccol~umnwithacetonitrileand0.2formic
5、acidaqueoussolutionasmobilephase.Thedetectionofglutamicacid一N,glyeine一N,asparticacid一Nandurea一N2wascarriedoutbyLC—MSwithelectrosprayioniza—tionunderselectedionmonitoringmode.Theknownisotopicabundanceofglutamicacid一“N。glycine一N,asparticacidNandurea一N2wascheckedbythedevelopedmethod.Therela
6、tivedeviationbetweentheknownisotopeabundanceandthecalculatedresultwasbelow0.7.Thismethodwithsimplepre—treatmentofbloodsample,shortcharacterizingtimeandhighaccuracywassuitabletomeasuretheisotopicabundanceofglutamicacid一N,glycine一N,asparticacid一Nandurea一N2inanimalblood.Keywords:N—labeledam
7、inoacids;isotopeabundance;liquidchromatography—massspectrometry收稿日期:2015-06—05;修回日期:20160512基金项目:上海市科技人才计划博士后基金(14R2142180o),科研院所技术开发研究专项资金(2014EG116258)作者简介:侯捷(1990一),男,辽宁沈阳人,在读研究生,研究方向稳定同位素标记氨基酸的分离纯化与表征。*E—mail:xiaoningdu@163.COITI。化学世界蛋白质是生命活动的承担者,一切生命活动都98.5)、天冬氨酸(纯度≥
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