羧基磁性微球的制备及其用于CD4细胞分离应用.pdf

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1、化学工程师ChemicalEngineer2011年第l2期文章编号:1002—1124(2011)12—0006—03科娥;羧基磁性徘的制备及其用于j嚣狻CD4细胞分离应用刘天孚,刘琦,王君(哈尔滨工程大学a.自动化学院;b.材料科学与化学工程学院,哈尔滨黑龙江150001)摘要:采用溶液聚合法制备具有良好悬浮性和磁响应性的羧基聚丙烯酰胺磁珠,对羧基磁性微球的形貌、结构、悬浮稳定性进行表征。研究结果显示,羧基聚丙烯酰胺磁性微球的平均粒径为2Onm,粒径分布比较均匀,近似为球形的壳核结构,核为磁性基质,壳为羧基聚丙烯酰胺;将羧基聚丙烯酰胺磁珠用于CD4细胞分离研究表明,分选后的

2、细胞纯度高达94%。关键词:磁性微球;聚丙烯酰胺;细胞分离中图分类号:TB383文献标识码:APreparationandceHularseparationappHcafionofcarboxylatedmagneticmicrospheres‘LIUTian—fu,LIUQib,WANGJun(a.CollegeofAutomation;b.SchoolofMaterialScienceandChemicalEngineering.HarbinEngineeringUniversity,Harbin150001,China)Abstract:Polyacrylamidemag

3、neticmicrosphereswithsul~acecarboxylgroupsweI.epreparedbysolutionpolymerization.ObtainedsampleswerecharacterizedbyTransmissionelectronmicroscopeandFouriertransforminfraredspectrometer.Resultsindicatedthatparticlesizeofthesamplesiswell—distributedandisabove20nln.Magneticmicrospherespossesscor

4、e-shellstructurewiththeCOleofmagneticsubstanceandtheshellofearboxy—latedpolyacrylamide.ResearchresultsoncellularseparationindicatedthatseparationefectofCD4celsiswellandpercentageisabove94%.Keywords:magneticmicrospheres;polyaerylamide;celularseparation细胞分离是生物细胞学研究中十分重要的技术,高效的细胞分离在临床中是首要的、重要的步

5、1实验部分骤,这种细胞分离技术在医疗临床诊断上有广泛的1.1试剂与仪器应用,传统的细胞分离技术(梯度离心、玫瑰花结等)显得繁琐,且耗时长,得率低。随着合成磁性微FeC1,、FeC1(天津双船化学试剂厂);K2S20。(沈球的发展,免疫磁性微球在分离细胞方面已经获得阳市新西试剂厂);十二烷基磺酸钠(sDS)(SERVA了快速的发展。磁性微球作为不溶性载体,在其表公司);丙烯酰胺(北京化学试剂公司);N,N’一亚钾面接上具有生物活性的吸附剂或其他配体活性物基丙烯酰胺(天津市化学试剂研究所)。质(如抗体、荧光物质等),利用它们与指定细胞的傅立叶变换红外光谱仪(美国NiCOLET-5D

6、X特异性结合,在外加磁场的作用下可用于细胞分FT—IR光谱仪);TEM电子透射显微镜(PHILIPSCM200FEG透射电镜);流式细胞仪。离、分类以及对其种类、数量分布的研究】。本文采用溶液聚合法制备具有羧基的聚丙烯酰胺磁珠,并1.2磁性微球的制备开展了羧基磁珠在CD4细胞分离领域的应用研究。量取20mL磁流体,与K2S2o。饱和溶液一起搅拌3~4h,加入0.05g十二烷基磺酸钠,0.5g丙烯酰胺,0.05gN,N·一亚钾基丙烯酰胺,N2保护下,在75%的油浴锅中反应2h后,再加入0.1g丙烯酰胺,收稿日期:2011-11-14基金项目:黑龙江省自然科学基金资助项目(E2()

7、o630)0.02gN,N·一亚甲基丙烯酰胺,0.2mL丙烯酸,继续作者简介:刘天孚(1964一),男,主任医师,教授,2003年毕业于哈尔反应2h后,升温至85~C反应6h左右,取出反应液,滨医科大学病理专业,获医学硕士学位。主要从事分子生用蒸馏水反复洗净未反应的单体。物医学方面的研究工作。2011年第12期刘天孚等:羧基磁性微球的制备及其用于CD4细胞分离应用1.3CD4细胞分离过程谱带归属为羰基特征吸收峰,567cm一是无机物细胞分离过程分为单个核细胞的提取、细胞计Fe30的特征峰。磁

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