苏氨酸三肽与DNA相互作用的研究.pdf

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1、化学工程师ChemicalEngineer2010年第11期文章编号：1002—1124(2010)11-0007—05科研篝：苏氨酸三肽与DNA相互作用的研究木：开发，王刚，马英杰。，卢奎(1．武汉生物工程学院，湖北武汉430415；2．河南工业大学化学化工学院。河南郑州450052)摘要：利用紫外一可见光谱法和凝胶电泳法研究了在人体正常的生理环境下苏氨酸三肽与DNA的相互作用。结果表明：苏氨酸三肽可与DNA发生相互作用，二者的作用模式为沟槽结合，结合常数为K=6．4x1OL·mol～，最大结合数n=7．04。关键词：紫外一可见分光光

2、度法；凝胶电泳法；苏氨酸三肽；DNA；相互作用中图分类号：0657．3文献标识码：AStudyoninteractionofthreonine-tdpeptideandDNAWANGGang．MAYing-jie．LUKui(1．WuhanBioengineeringlnstituge，Wuhan430415，China；2．CollegeofChemist~"andChemicalEngineering，Zhengzhou450052，China)Abstract：TheinteractionbetweenThr—Thr—Thrand

3、DNAwasstudiedbyUV—Visspectrophotometryandgelelectrophoresismethodintl1ephysiologicalenvironmentofhuman’S．TheresultsshowedthattherewasaninteractionbetweenThr—Thr-ThrandDNA．Theactionmodelmightbegroovecombination．TheBindingConstant(K=6．4xl0L·mol)andthemaximumbindingnumber(n

4、=7．04)wereobtained．Keywords：UV-Visspectrophotometry；gelelectrophoresismethod；threonine-tripeptide；DNA；interaction脱氧核糖核酸(DNA)是生物体内的重要组成物质，是遗传信息的主要载体。其与生物的生长、发1实验部分育和繁殖等密切相关。小分子可与其发生相互作1．1仪器与试剂用，从而影响人体的生长、发育和繁殖等，从而小分子可应用于生物医药、功能性食品及生命科学等领UV一2450紫外一可见分光光度计(日本岛津公域『1．2】。司)；DY

5、Y一8c型电泳仪(北京市六一仪器厂)；紫外苏氨酸是一种重要的营养强化剂，有恢复人体凝胶成像仪(美国BIO—RAD('f~乐)公司)。疲劳，促进生长发育的效果，并且对保护细胞膜起苏氨酸三肽参照文献方法制备，用二次蒸馏重要作用，在体内能促进磷脂合成和脂肪酸氧化。水配成浓度为3．490XlO-4mol·IJ_的溶液；DNA(A．其制剂具有促进人体发育抗脂肪肝药用效能，是复R．Sigma公司，0～4oC保存，用前未作进一步处理，合氨基酸输液中的一个成分。因此，由它们形成的纯度以260nm与280nrn处吸光度的比值检测(4猢寡肽，也应具有巨大的

6、潜在应用价值。并且与氨基／瑚=1．872>1．8，符合实验要求)，利用260nm处酸相比，寡肽的吸收速度和效率更高，且其可由肠的吸光度确定其浓度(￡=6600L·(mol·cm))为道不经降解直接吸收_3'引。由此可以推测苏氨酸形成2．227X10mol·；1．0mol·LNaC1溶液；1．0mol-的寡肽比苏氨酸本身更易被人体吸收，其可能具有NaH2PO溶液；Tris—HC1缓冲溶液(pH值为比苏氨酸更高的生物活性。7．40)。其余试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏因此，为了研究苏氨酸寡肽在生物医药、功能水。性食品及生命科学等领域的潜

7、在应用价值，考察了1．2实验方法苏氨酸三肽(Thr—Thr—Thr)与DNA的相互作用。1．2．1紫外一可见吸收光谱法研究Thr—Thr—Thr与DNA的相互作用(1)分别取配好的DNA溶液、Thr—Thr—Thr溶收稿日期：2010—09—06液、NaC1溶液和NaH2PO溶液各100L，用Tris—基金项目：国家自然科学基金资助项目(NO．20572016，NO．20772023)；HC1缓冲液稀释到10mL，用Tris—HC1缓冲液作参河南省教育厅科技计划资助项目(NO．2006KYCX017)比测定200～400nm的紫外吸收光

8、谱。作者简介：王刚(1982一)，男，武汉市人，实验师，本科。王刚等：苏氨酸三肽与DNA相互作用的研究2010年第11期(2)Thr—Thr—Thr浓度对Thr—Thr—Thr—DNA体系紫外光谱的影响于一