DHAR与草莓AsA积累关系及DHAR RNAi遗传转化研究.pdf

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1、南方农业学报JOURNAL0FS0uTHERNAGRIcULllURE2012，43(11)：】626—1632ISSN2095一I191：CODENNNXAABhttp：／／w州．nfnyxb．comDOI：10．3969，j：lssn．2095一1191．2012．11．1626DHAR与草莓AsA积累关系及D础RRNAi遗传转化研究张丙秀k2一，李柱刚4，高媛，，刘丹，，高庆玉，+(1黑龙江省农业科学院博士后科研工作站，哈尔滨150086；2东北林业大学博士后科研流动站．哈尔滨1500863东北农业大学，哈尔滨150030；4黑龙江省农业科学院，哈尔滨150086)摘要：

2、【目的】确定草莓脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)酶活性与抗坏血酸(AsA)的关系，研究DHAR对AsA积累的调控作用，为筛选高AsA草莓品种育种提供理论基础。【方法】于不同时期测定草莓果实AsA含量和DHAR酶活性并进行相关性分析，构建DHAR基因RNAi植物表达载体，通过农杆菌介导法，将RNAi檀物表达载体导入草莓中。(结果】草莓果实成熟过程中AsA含量呈现上升趋势，生长后期含量增幅最大。随着草莓果实的成熟，DHAR酶活性逐渐增大，在生长后期酶活性最高。构建了脱氢抗坏血酸酶基因(DHAR)的RNAi植物表达载体(Part27一ID泓R)，并采用农杆菌介导法转入草莓，共获7株Pc

3、R阳性植株，初步说明目的基因已整合到草莓组织中。【结论】DHAR酶活性与AsA积累呈显著正相关，获得的转基因植株可为下一步研究提供植物材料。关键词：草莓；DHAR；AsA；RNAi；遗传转化中图分类号：s668．4文献标志码：A文章编号：2095—119l(2叭2)11一1626一07RelationshipbetweenDHARandAsAaccumulationinstrawberryandits删．ARRNAigenetictransformationZHANGBing—xiul，2”，LIZhu—gan94，GAOYuan3，LIUdan3，CAOqing—yu3+(1

4、PostdDctoralProgramWorkst撕onDfHeil叽由iangAcademyofAgricultura】Sciences，Harbin15D086，China；2PDstdoctomlPmgramWorkstatioJlofNonheastForestrvUniverSity，Harbin150086，China；3NortheastAg“culturalUniversity，Harbin150030，China；4Heilon自iangAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150086，China)Abstract：【0bj

5、ective】ThisresearchpreliminarilyidentmedstrawbenyDHARenzymeactlvityanditsrelationshipwithAsAandstudiedtheeⅡbctsofDHARonregulatingAsAaccumulationusingRNAitechnologiesinordertoprovidetheoreticalbasisforbreedinghighAsAstrawberryvarieties．【Method】TheAsAandDHARactivitiesofstrawberryfhitduringdiff

6、erentperiodsweremeasuredandcoH芑IativeIvanalv2ed．BvtheAgmbac￡e『{lj瑚￡￡王me岛c站nstrans岛rmatio￡lmed卜atedmethod，theRNAiplantexpressionvectorofDHARgenewerecDnstmctedandintroducedintostrawbeny．【Result】TheAsAcontentofstrawberryfhlitduringripeningstagedisplayedanincreasingtrend，inwhichduringthelategrow

7、thpenod。theAsAcontentshowedthelargestincrease．Asthestrawben_yfmitsmatured，theDHARactivitiesincreasedgraduallyandmeasuredthehighestduringthelategrowthstage．ThePlantexpressionVectorRNAi(pazt27一ID}lAR)oftheDHARgenewasconstmcted，andtheAgT06acfe—u脚fumef