PCV2 WH株人工感染断奶仔猪复制多系统衰竭综合征.pdf

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1、南方农业学报JournalofSouthernAgrieuhure2014，45(5)：864—869ISSN2095—1191；CODENNNXAABDOI：10．3969／j：issn．2095—1191．2014．5．864PCV2WH株人工感染断奶仔猪复制多系统衰竭综合征吴胜昔1，梁望旺2，徐斌3，曾政”，蔺露2，董春霞2，熊仲良2(1重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆400054；2重庆市动物疫病预防控制中心，重庆4011203重庆市巴南区动物疫病预防控制中心，重庆400050)摘要：【目的】建立猪圆环病毒2型(Pcv2)WH株人工感染断奶仔猪多系统衰竭

2、综合征(PMws)的动物模型，为探讨PCV2的致病机理及疫苗免疫效果评价奠定基础。【方法】将PCV2WH株通过颈部肌注和滴鼻感染PCV2抗体阴性的7N龄仔猪，攻毒后第4、7d用钥孔血蓝蛋白(KEn)进行刺激，第7、11dR腹腔注射巯基乙酸，同时设阴性对照组(单独KLH束I]激)。攻毒后第35对h杀所有试验猪，观察其组织病变，并取肺脏、淋巴结组织提取病毒DNA，用PCR检测Pcv2；取试验猪的肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、心脏、膀胱等组织制作石蜡切片，进行HE染色和免疫组化分析。【结果】攻毒组仔猪的临床症状主要表现为发热、消瘦、被毛粗乱、皮肤苍白；攻毒后第35对h杀

3、所有试验猪，剖检发现阴性对照组未出现病理变化，而攻毒组仔猪有明显病理变化，从其病变的肺脏、淋巴结、肾脏、脾脏、肝脏、心脏组织中均能检测到Pcv2。HE染色结果显示，组织病理学变化主要为间质性肺炎、淋巴细胞缺失、间质性肾炎、肝脏肝窦单核巨噬细胞增生。免疫组化分析结果显示，肺脏支气管上皮细胞呈明显阳性，部分肺泡巨噬细胞可见阳性信号，主要位于胞浆内；肠系膜淋巴结均出现较强阳性信号，主要位于淋巴细胞的胞浆内；肾间质细胞呈明显阳性。【结论】用PCV2WH株攻毒联合KLH和巯基乙酸反复刺激断奶仔猪能成功复制出PMWS，为后续PCV2疫苗的免疫效果评价及PMWS发病机理研究提供了

4、理想的动物模型。关键词：猪圆环病毒；PCV2WH株；断奶仔猪多系统衰竭综合征；钥孔血蓝蛋白；HE染色；免疫组化分析中图分类号：$858．28文献标志码：A文章编号：2095—1191(2014)05—0864—06ArtificialinfectionofPCV2WHstraininducedpostweaningmultisystemicwastingsyndrome(PMWS)inpigletsWUSheng—xil，LIANGWang—wan92，XUBin3，ZENGZheng"，LINLn2，DONGChun—xia2．XIONGZhong—lian92(

5、iSchoolofPhamlacy&Bioengineering．ChongqingUniversityofTechnology．Chongqing400054．China；2ChongqingAnimalDiseasePreventionandControlCentre，Chongqing401120，China；3BananDistrictAnimalDiseasePreventionandControlCenter，Chongqing400050，China)Abstract：【Objective】ThepigletnlodelofPCV2inducedPMW

6、SwasestablishedforthestudyonpathogenicmechanismandvaccineevaluationofPCV2．【Method】Healthy7一week—oldpigletswereintectedbvPCV2WHstrainthroughbothneckintramusculariniectionandintranasaladministration．Then．pigletswereimmunizedwithkeyholelimpethemocyaninfKLH)onthe4“and7“dayafterchallenge．re

7、spectively．followedbyintraperitonealiniectionofthioglycollicacidonthe7“and11“dayafterchallenge．Additionally．thenegativecontrolgrouponlyreceivedKLH．Experimentalanimalswereslaughteredonthe35“day．afterwhichpost—inorlelnexaminationswerecarriedoukLungsandlymphnodeswerecollectedfordetectio