微生物培养打印TY.doc

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1、课题一微生物的实验室培养1•培养基:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。琼脂是从红藻中提取的,在配制培养基中用作为0标准培养基类型配制特点主要应用物理性质培养基加入琼脂较多菌种分离,鉴定,计数培养基加入琼脂较少菌种保存培养基不加入琼脂工业生产,连续培养化学组成培养基由配制而成,培养基成分明确菌种分类、鉴定培养基由配制而成,培养基成分不明确工业生产,降低成本目的用途培养基添加某种或菌种的鉴别培养基添加(或缺少)某种化学成分菌种的分离2•培养基的化学成分包括等,在此基础上,培养基还需满足微生物生长的—、和等要求,例如,

2、培养时需要在培养基中添加维生素,培养时须将培养基的pH调至酸性,培养是需要将pH调至中性或微碱性。。牛肉膏和蛋白腺主要为微生物提供、和等物质。3.获得纯净培养物的关键o3」无菌技术包括:(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行:(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行:(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在附近进行;(4)避免已灭菌处理的材料用具与相接触。3.2消毒方法「消毒方法有等(写4种)。比较理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽砲和砲子能否被消灭消毒灭菌全部微生物(1)日常生活经常用到的是消毒法;(2)对一些不耐高温的液体

3、,则使用消毒法;(3)对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒等溶液以增强消毒效果,然后使用进彳亍物理消毒。(4)实验操作者的双手使用进行消毒;(5)饮水水源用进行消毒。3.3灭菌方法:(1)接种环、接种针、试管口等使用灭菌法;(2)玻璃器皿、金属用具等使用法,所用器械是;(3)培养基、无菌水等使用所用器械是。(4)表面灭菌和空气灭菌等使用灭菌法,所用器械是o3.4物品装入髙压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是;随后关闭排气阀继续加热,气压升至,温度为并维持:最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至时打开锅

4、盖,目的是防1Lo3.5.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?答:4制作牛肉膏蛋白月东固体培养基方法步骤.⑴2).•(3)・溶化:将称好的连同一同放入烧杯;用搅拌。搅拌目的是防止:最后调节(4).将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌;所用培养1111用报纸包扎后用灭菌。(5):待培养基冷却至50°C左右时在洒精灯火焰附近操作进行。倒平板操作的步骤:①将灭过菌的培养皿放在,右手拿,左手0②拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口:③用打开一条的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养1111,左手

5、立即盖上培养皿的皿盖。④待平板冷却凝固后,将平板放置。4.1.平板冷凝后,为什么要将平板倒置:-42在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这平板为什么不能用来培养微生物o5.菌落概念。.微生物接种的最常用方法是和,另外还有和5」平板划线法:通过在琼脂固体培养基表面操作,将聚集的菌种逐步到培养基表面。平板划线法操作步骤是:①将接种环在灼烧直至烧红。%1在冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。%1将菌种试管口通过火焰达到的目的。%1将冷却的接种环伸入到菌液屮取出。⑤将菌种试管口再次后塞上棉寒。⑥将皿盖打开一条缝

6、隙,把接种环伸入平板内划3〜5条线,盖上皿盖,不要划破。⑦灼烧接种环,冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。⑧将平板放在培养箱中培养。5.2取菌种前灼烧接种环的目的;其余划线前也都要灼烧接种环的目的是消灭:取菌种和划线前都要求接种环后进行,英目的是防止:最后灼烧接种环的目的是防止5.3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?6•稀释涂布平板法:将菌液进行一系列,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当足够高吋,即可获得单个细菌形

7、成的。6」系列稀释操作:%1取盛有9mL水的无菌试管6支,编号101010'、1010106o%1用灼烧冷却的移液管吸取ImL菌液注入编号为IO】试管中,并3次,使之混匀。%1从10】倍液中吸IRimL菌液注入到编号为IO?试管内吹吸均匀,获得IO?倍液。依此类推。操作中试管口和移液管应在离火焰1〜2cm处。整个操作过程中使用了支移液管。6.2倒平板操作①将浸在盛有酒精的烧杯中,②取少量菌液滴加到%1将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待后,冷却8・10秒。%1用将菌液均匀的土布在培养基表面,涂布时可转动,使菌液分布均匀。6.3

8、培养未接种培养基的作用是,若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。7.菌种的保存对于频繁使用的菌种,可以采用的方法。配制固体斜而培养基中,试管要加塞棉塞的目的是。试管培养基形成斜面的作用。①临时保藏方法缺点。每

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