实验三红细胞和白细胞计数.ppt

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1、红细胞和白细胞计数医学检验系一、红细胞计数目的掌握显微镜手工计数的方法。原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数。一、红细胞计数器材显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球试剂生理盐水标本EDTA抗凝血6操作1加稀释液取小试管1支,加红细胞稀释液2ml。2加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl,擦去管外余血,轻轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,立即混匀。3充池混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池,室温下平放3~5分钟

2、,待细胞下沉后于显微镜下计数。4计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。5计算红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012注意事项1.将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。2.红细胞在计数池中若分布不均,每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内,2次红细胞计数相差不得超过5%。二、白细胞计数目的掌握显微镜白细胞计数的方法。原理用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,

3、在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液中的白细胞数。器材显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球试剂白细胞稀释液标本EDTA抗凝血二、白细胞计数1.加稀释液用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。2.加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,混匀。3.充池混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池,室温下平放3~5分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。4.计数用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。5.计算红细胞/L=N

4、/4×10×106×20=N/20×109/L操作1.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。2.白细胞在计数池中若分布不均,大方格间细胞计数相差一般不超过10%。3.白细胞数量过多时,可采取加大稀释倍数的方法。4.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,它可使白细胞计数偏高,此时应计算白细胞校正值。注意事项作业1.本次实验的关键环节是什么?2.假定某次白细胞计数为6×109/L,其中分类100个白细胞有20个有核红细胞,问白细胞的实际数量是多少二、白细胞计数

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