实验七培养基的配制与灭菌.ppt

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1、实验七培养基的配制与灭菌一、实验目的1、掌握培养基配制的一般方法与步骤。2、了解常见的灭菌方式，掌握高压灭菌的原理及操作。3、掌握基本实验器材的包扎。二、实验原理（一）培养基的配制培养基是由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。培养基的六大营养因素：碳源氮源能源生长因子无机盐水培养基的类型据组成成分可分为:1、合成培养基2、天然培养基3、半合成培养基从培养基的物理状态可分为：1、液体培养基2、固体培养基3、半固体培养基据用途可分为：1、基础培养基2、加富培养基3、选择培养基4、鉴别培养基实验基本流程：设计，计算，准备原料称量、

2、溶解调节pH分装（过滤澄清）灭菌塞棉塞和包扎（摆斜面）液体：试管¼，三角瓶1/3固体：三角瓶1/2（二）灭菌和消毒技术1.火焰灼烧：对金属器皿的灭菌2.干热灭菌：180℃2－3小时（对器皿的灭菌）3.湿热灭菌常压蒸汽灭菌：巴氏消毒法，间歇灭菌法蒸汽持续灭菌法高压蒸汽灭菌：121℃30分钟4.过滤除菌5.紫外线杀菌：紫外线照射20分钟以上，对空气杀菌6.化学药剂消毒和杀菌热蒸汽121℃,25min115℃,35min加水，装锅，升压保压，降压与排气，出锅，烘干。高压蒸汽灭菌三、实验材料250ml、500ml三角瓶15ml试管培养基配制的化学药品和琼脂棉花

3、报纸10ml移液管，100ml量筒，500ml量筒，1000ml量筒各2个1ml移液管5根10NNaOH孟加拉红水溶液pH试纸，电炉，标签纸，玻棒，铝锅，天平四、实验内容牛肉膏蛋白胨培养基固体3L（500ml三角瓶分装X9，每瓶加琼脂8克）马丁氏培养基固体1L（500ml三角瓶分装X3，每瓶加琼脂8克）高氏一号培养基固体1L同上淀粉培养基固体1L同上葡萄糖蛋白胨水培养基液体5ml/试管40支蛋白胨水培养基液体5ml/试管40支3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基液体5ml/试管75支，内装指形管伊红美兰培养基固体500ml（500ml三角瓶分装X2，每瓶加琼脂7.

4、5克）无菌水9ml/支30支无菌水90ml/瓶20瓶牛肉膏蛋白胨培养基:1%NaCl5%NaCl各300mL（500ml三角瓶，每瓶加琼脂8克）10%NaClpH5pH7各300mL（500ml三角瓶，每瓶加琼脂8克）pH9四、实验内容五、思考题1、简述高压灭菌锅的灭菌原理及使用注意点。2、培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？3、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题？为什么？