儿童软骨发育不全和并多指症的基因诊断新技术的研究.pdf

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1、论文一应用高分辨率熔解曲线分析法快速检测软骨发育不全病人FGFR3基因G1138A和G1138C突变中文摘要目的和意义软骨发育不全（Achondroplasia，ACH）是常见的因肢体短缩导致的侏儒症之一，是常染色体显性遗传病。研究发现，成纤维细胞生长因子受体3（fibroblastgrowth-factorreceptor3，FGFR3）基因上的少数几个突变位点可以引起先天性软骨发育不良，而且98%的突变位于核苷酸1138位（c.1138），即c.1138G>A和c.1138G>C。早期发现、早期诊断和早期治疗或对患病胎儿进行终止妊娠是目前对该病最常用的临床干预措施。本

2、实验旨在探索和构建一种应用高分辨率熔解曲线（High-resolutionmelting，HRM）分析法对先天性软骨发育不全进行基因诊断的突变筛查方法。高分辨率熔解曲线（High-resolutionmelting，HRM）分析法是一种简捷和可靠的分子检测方法，特别适用于单基因突变疾病。方法在本研究中，我们同时使用HRM和限制性片段长度多态性-多聚酶链反应（PCR-RFLP）法对14例软骨发育不全的病例进行FGFR3基因突变分析并进行两种方法的对比。６结果检测显示11个病人携带有c.1138G>A突变，1个病人携带有c.1138G>C突变，但其中的一个家系（包括两个成员）

3、未发现突变。两种方法结果一致。结论我们认为与PCR-RFLP方法相比，HRM分析法是一项更加简捷，可靠和廉价的检测手段，更适合作为先天性软骨发育不良病人FGFR3基因常见突变临床检测的方法。本研究率先在国内构建了一套应用HRM技术对先天性软骨发育不良致病基因进行诊断的新方法。关键词软骨发育不全；高分辨率熔解曲线；限制性片段长度多态性-多聚酶链反应；突变；检测７RapiddetectionoftheG1138AandG1138CmutationsofFGFR3geneinpatientswithanchondroplasiausinghigh-resolutionmelti

4、nganalysisAbstractObjectiveAchondroplasia(ACH)isoneofthemostcommonformsofcongenitalshortlimbdwarfismwithanautosomaldominantinheritance.Todate,themutationsofonlylimitedspecialsitesinfibroblastgrowth-factorreceptor(FGFR3)genearereportedasacauseofachondroplasiaandalmost98%ofachondroplasiacas

5、esarecausedbythemutationsinposition1138ofFGFR3(Gly380Arg),including97%ofc.1138G>Aand1%ofc.1138G>Cmutations.ClinicallyearlydiagnosisandearlyabortionortreatmentisthemoderncurrenttrendinmainlandChina.Ourobjectiveistofindoutandestablishasimple,reliableandrapidapproachformoleculardetectionofth

6、emostcommonmutationsinordertopreventanddiagnosethisdisease.MethodsHigh-resolutionmelting(HRM)analysisisareliable,rapidand８lowexpensemoleculardetectionapproachandhasbeengenerallyappliedtomutationscanning.Inthisstudy,14caseswithachondroplasiaincluding10sporadiccasesandtwopedigrees(fourcases

7、)weredetectedsimultaneouslyusingHRManalysisandPCR-RFLP.Results11caseswereidentifiedtocarrythec.1138G>Amutationandonewasthecarrierofc.1138G>Cmutation.Nothingwasfoundinother1pedigree(2cases).ConclusionsComparedwithPCR-RFLP,HRManalysisisamorerapid,simpleandcheapapproac