金银花检验方法验证方案.doc

《金银花检验方法验证方案.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、金银花检验方法验证方案本品为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花。夏初花开放前采收，干燥。性状本品呈棒状，上粗下细，略弯曲，长2～3cm，上部直径约3mm，下部直径约1.5mm。表面黄白色或绿白色（贮久色渐深），密被短柔毛。偶见叶状苞片。花萼绿色，先端5裂，裂片有毛，长约2mm。开放者花冠筒状，先端二唇形；雄蕊5，附于筒壁，黄色；雌蕊1，子房无毛。气清香，味淡、徼苦。鉴别取本品粉末0.2g，加甲醇5ml，放置12小时，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，

2、加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液10～20μl、对照品溶液lOμl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7：2.5：2.5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。检查水分不得过12.0%(附录ⅨH第二法)。总灰分不得过10.0%(附录ⅨK)。酸不溶性灰分不得过3．O%（附录ⅨK）。重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法（附录ⅨB原子吸

3、收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法）测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。含量测定绿原酸照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液(13：87)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。对照品溶滚的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每Iml含40μg的溶液，即得(10℃以下保存)。供试品溶液的制备取本品粉末

4、（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率30kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～lOμl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含绿原酸(Cl6H1809)不得少于1.5%。木犀草苷照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。色谱条件与系统适用性试验用苯基硅烷键合硅胶为填充剂

5、（AgilentZORBAXSB-phenyl4.6mm×250mm,5pm），以乙腈为流动相A，以o．5%冰醋酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为350nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20000。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）0～1510→2090→8015～30208030～4020→3080→70对照品溶液的制备取木犀草苷对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Iml含40μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品细粉末（过四号筛）约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精

6、密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率35kHz)l小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液lOml，回收溶剂至干，残渣用70%乙醇溶解，转移至5ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10弘l，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含木犀草苷(C21H20O11)不得少于0.050%。四、验证小组成员及职责4.1验证小组成员4.2人员职责人员职责验证小组组长组织相关的验证培训；负责起草验证方案、

7、组织项目的具体验证、督促验证小组成员按照验证方案的要求做好验证记录；起草并完成验证报告，对整个验证项目负责。验证小组成员按照方案实施验证、并做好记录、意外情况及时汇报和记录、协助起草验证方案和报告。表1：五、验证实施步骤5.1、为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施5.2仪器：己经过校正并在有效期内5.3人员：均经过培训，熟悉方法及使用的仪器5.4对照品：均购自药品检验所5.5材料：均符合检验要求5.6参考资料：《中国药典》2010年版一部《药品生产验证指南》(2003版)检测结果:表检验结果

8、结果判断试验A试验B检测人:检测日期:5.7验证标准:试验A供试品溶液在与对照药材溶液及对照品溶液相同的位置显相同颜色的斑点。试验B供试品溶液在与对照品溶液相同的位置未显斑点。5.8检验结果评价六含量测定照高效液相色谱法测定。仪器：LC-10AT液相色谱仪6.1空白溶液的制备：直接取甲醇作为空白溶液。6.2将结果填入下表。表含量测定专属性试验表保留时间供试品溶液对照品溶液空白溶液检测人：检测日期：6.3验证标准：