实验十-胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响.ppt

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1、实验十胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响原理胰岛素能降低血糖，肾上腺素能升高血糖给动物注射胰岛素或肾上腺素取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量通过公式计算血糖改变百分率血糖改变%=注射后BS－注射前BS注射前BS×100%原理葡萄糖＋O2＋H2OGOD葡萄糖酸＋H2O2本实验是葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD)相偶联发生的偶联反应2H2O2＋4-氨基安替比林＋酚POD红色醌类化合物＋H2O操作步骤动物准备注射前取血注射激素注射后取血计算结果称体重，重的注射胰岛素，轻的注射肾上腺素已准备腹部皮下45°注射，不要

2、穿入腹腔内脏作好标记防止溶血测定血糖加样要准反应时间一致505nm比色注射激素和取血计算注射剂量：胰岛素为0.75U/Kg体重，肾上腺素为0.4mg/Kg体重；皮下注射激素；注射激素后取血，时间：肾上腺素30min，胰岛素1h（心脏取血）；采血后静置10min至血清析出；3000r/min离心分离10min，吸取血清至新的EP管中，做好标记。取小试管4支，编号，按下表操作：加入物(ml)空白管标准管测定前测定后血清－－0.010.01葡萄糖标准应用液－0.01－－蒸馏水0.01－－－酶酚混合试剂1.501.501.50

3、1.50血糖测定混匀，置37°C水浴中，保温15min，加2.0mlH2O混匀后在波长505nm处比色，以空白调零，测定各管吸光度。注意事项1.腹部皮下注射，以45°进针，针头不要刺入腹腔，更不要穿破皮肤注射到体外。2.最后加酶酚混合试剂，各管反应时间应一致。3.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量结果计算血糖改变%=注射后BS－注射前BS注射前BS×100%血糖浓度(mmol/L)=A测定管A标准管×C标准管思考题葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖含量，为什么？