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1、第5卷第3期潍坊高等职业教育Vo.l5No.32009年9月WeifangHigherVocationalEducationSep.2009多元线性回归模型在水稻紫米花色素与相关物质分析中的应用122韩磊,汪旭东,吴先军(1.潍坊职业学院,山东潍坊261031;2.四川农业大学水稻研究所,四川温江611130)摘要:在水稻紫米发育过程中,对花色素、类黄酮、多酚、苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶进行提取和测定,并对测定的结果进行统计分析。分析结果表明:总酚和苯丙氨酸解氨酶的活性对花色素的偏回归系数不显著;类黄酮对花色素的偏回归系数达显著水平,多酚氧化酶的
2、活性对花色素的偏回归系数达极显著水平,建立了最优二元回归方程。用标准偏回归系数测得类黄酮对花色素的相对影响占0.5723,多酚氧化酶活性对花色素的相对影响占0.5725。花色素与类黄酮和多酚氧化酶活性的复相关达极显著水平;类黄酮与多酚氧化酶活性的偏相关系数不显著。关键词:花色素;类黄酮;多酚;苯丙氨酸解氨酶活性;多酚氧化酶活性;线性回归中图分类号:S511文献标识码:A引言1.2.1发育过程中糙米花色素、类黄酮及多酚的提取和测定[2,3]黑米多为长粒形,米粒表皮呈黑色、紫色及褐色。黑米参考刘敬兰与AntoniaProcissietc.的方法稍加修色素属
3、于黄酮类花色素。目前,黑米可供直接食用、熬粥、制改。将处于不同发育时期糙米的果皮和种皮小心完整地糕、做饼、酿酒以及用于食疗、药疗,也可从中提取自然色素用剥下,放入1.5mL离心管,每管只放一粒种子的果皮和种于食品工业。根据本草纲目!记载,黑米具有滋阴补肾、健皮。用尖镊子沿管壁将皮磨碎,加入0.9mL甲醇,滴2滴2N盐酸(酸化甲醇作对照)。放入65∀水浴箱暗保温1h。脾胃、明目活血之功效。黑米中的功能因子黄酮类花色素,具10,000rpm离心2min,取100L上清液,按照糙米色由浅有维持血管正常渗透压;减轻血管脆性;防止血管破裂和止血至深的顺序用BECK
4、MANDU800分光光度计测280nm(总作用;能够降低血压;改善心肌营养;降低心肌耗氧量;对先天酚)、325nm(类黄酮)、530nm(花色素)、600nm下的吸光性过敏皮炎很有效果;黑米还有接骨生肌的功效;对头晕、贫[4]血、白发也有疗效;还有延缓衰老、改善缺铁性贫血、抗应激反度。以#OD530-OD600=0.1作为花色素的单位。[1]1.2.2多酚氧化酶的提取和活力测定应以及免疫调节;抑制癌细胞和抗癌作用等。[5]参考胡桂兵等的方法稍加改动。取一粒种子的果苯丙氨酸解氨酶(PhenylalanineAmmoniaLyase,简称皮与种皮,放入1.5m
5、L的离心管,加3滴磷酸缓冲液(pHPAL)是莽草酸途径中的关键酶,它催化由苯丙氨酸到各5.5),在4∀冰箱中研磨,补足磷酸缓冲液至1mL,保温种酚类物质的第一步反应,为多种酚类及黄酮类终产物提30min;加0.4mL0.1mol/L邻苯二酚(对照用磷酸缓冲液,供前体物质。多酚氧化酶(PolyphenolOxidase,简称PPO)无邻苯二酚),混匀,35∀水浴15min,10000rpm离心2min;是催化酚类物质氧化聚合形成色素的重要酶类。类黄酮取100L上清,用BECKMANDU800测325nm下吸光度,代表了一大类植物次生代谢产物,其中包括花青苷
6、、黄酮以磷酸缓冲液为对照。隔15min再测一次。酶活力以每醇、黄烷酮和异黄酮等,有些类黄酮物质是花色素生物合15nin光密度变化0.01为一个活性单位。成途径的中间产物和底物。本文通过统计分析的方法,研1.2.3苯丙氨酸解氨酶的提取和活力测定究它们之间的关系,希望能为花色素的实验室合成提供理[6]参考叶小利等的方法稍加改动。取一粒种子的果皮论基础,从而能够人工生产这些花色素。与种皮,放入1.5mL的离心管,加3滴硼酸缓冲液(pH8.7),1材料与方法在4∀冰箱研磨,保温30min,补足硼酸缓冲液至1mL,加1.1供试材料0.4mL0.02mol/L苯丙氨酸
7、(对照用硼酸缓冲液,无苯丙氨紫米纯系黑珍米。酸),混匀,30∀水浴30min,加0.25mL5mol/LHCL停止反应,1.2方法10000rpm离心2min,取100L上清液,用BECKMANDU800收稿日期:2009-08-10作者简介:韩磊(1969),女,山东寒亭人,潍坊职业学院副教授,博士。主要研究方向:植物遗传育种研究。∃55∃潍坊高等职业教育2009年9月测290nm下吸光度。隔15min再测一次。酶活力以每15min2.3多元线性回归光密度变化0.01为一个活性单位。2.3.1四元线性回归方程的确立及测验1.3数据处理由二级数
8、据得正规方程组[7]数据处理及统计方法参照荣廷昭等的方法。为了SS
