临床医学毕业论文肾小管免疫组织化学非特异性反应的控制方法探讨.doc

《临床医学毕业论文肾小管免疫组织化学非特异性反应的控制方法探讨.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、XX大学毕业论文肾小管免疫组织化学非特异性反应的控制方法探讨2014年6月25日肾小管免疫组织化学非特异性反应的控制方法探讨作者：杨侃，景丽，安欣，秦憬，郭风英，张建屮【摘要】ri的观察抗体质量和封闭方法对肾小管免疫组织化学非特异性反应的影响，探讨其控制方法。方法采用免疫组织化学SP法检测肾脏血管平滑肌肌动蛋白(a-Smoothmuscleactin,SMA),对比观察不同公司的抗体及不同封闭方法对肾小管菲特杲性免疫组织化学染色的影响。结果各组采用正常山羊血清封闭，不同抗体检测结果可见：1号抗体组，

2、肾小管上皮细胞内可见弥漫性棕黄色颗粒状着色，II在肾脏皮质区内远曲小管为重；2号抗体组，染色结果与1号抗体基木相同；3号抗体组，肾脏组织中血管平滑肌细胞内均呈棕黄色着色，肾小管上皮细胞内未见着色。各组分别采用正常山羊血清、5%BSA、25%蛋清液及正常山羊血清+25%蛋清混合液封闭后的染色结果可见：1号抗体组，采用正常山羊血清+25%蛋清混合液封闭后，肾小管丄皮细胞染色强度减轻；2号抗体组，在使用不同封闭液的各组间，未见差别；3号抗体组，肾小管上皮细胞内未见着色，其屮，25%蛋清+正常山羊血清混合封

3、闭的效果最佳。结论在免疫组织化学技术屮，选择适半的封闭液和抗体是有效控制非特异性染色的重要因素。【关键词】免疫组织化学；肾小管；非特异性；平滑肌肌动蛋白Abstract:ObjectiveToexplorethemethodtosuppressthenonspecificimmunorcactionofrenaltubules.MethodsAcomparativeinvestigationwascarriedamongtheantibodiesfromdifferentcompaniesanddi

4、fferentblockingintheratkidneybymeansofStreptavidin-peroxidasetechnique.ResultsTheresultsusingnormalgoatserumblockingshowedthattherewerediffuseyellowgranullarstaininginrenaltubuleepithelium,andmorepowerfulstainingwerefoundindistalconvolutedtubuleofkidne

5、ycorticalinNo.lantibodygroupthanthatinothergroups.ThestainingprofileintheNo.2antibodygroupwasthesameasNo.lgroup.Therewereyellowstaininginvascularsmoothmusclecellofkidney,andnostaininginrenaltubuleepitheliumintheNo.3antibodygroup・Theresultsusingdifferen

6、tblockingincludingnormalgoatserum,5%BSA,25%eggwhite,andmixingliquorofnormalgoatscrumwith25%cggwhiteshowedthatthestainingintensityinrenaltubuleepitheliumwaslessenusedthemixedliquidintheNo.lantibodygroup・Therewerenosignificantdifferenceamongthedifferentb

7、lockingintheNo.2antibodygroup・TherewasnostaininginrenaltubuleepitheliumintheNo.3antibodygroup・Thebestimmunostainingwasobservedinthegroupwithmixedblockingliquid,normalgoatscrumwith25%eggwhite.ConclusionItisanimportantfactorforimmunohistochemistrytoselec

8、ttheblockingliquidandtheantibodytosuppressthenonspecificreaction.Keywords:immunohistochemistry;kidney;nonspecificity;a-Smoothmuscleactin免疫组织化学技术作为研究蛋白质在细胞原位分布的一种常用方法，具有特异性强、灵敏度高等优点，能够直接进行定性和定量的形态观察，为疾病的诊断、鉴别诊断和发生机制等研究提供有力的手段，是一项不可缺少的技术［