临床医学论文-成人不同部位角质形成细胞的生物学特性比较.doc

《临床医学论文-成人不同部位角质形成细胞的生物学特性比较.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、临床医学论文•成人不同部位角质形成细胞的生物学特性比较作者：韩军涛，王洪涛，胡大海，蔡维霞，汤朝武【摘要】H的：观察成人不同部位角质形成细胞的生物学差杲，探讨用来构建自体组织工程皮肤的最佳表皮细胞來源.方法：体外分离培养成年男性头皮、躯干、下肢及包皮来源的角质形成细胞，分别利用绘制细胞生长曲线、3H胸腺“密噪(3HTdR)掺入、流式细胞仪检测等方法比较细胞在牛长增殖、细胞周期及代谢等方而的生物学差异.结果：在细胞的生长增殖及DNA合成代谢方而，头皮与包皮来源的角质形成细胞之间无统计学差界(P>0.05),躯干与肢体来源的细胞之间亦无统计学差异(P>0・0

2、5),但前两者均高于后两者(PvO.05)；细胞周期分析表明，头皮及包皮来源的角质形成细胞S期比例高于躯干及肢体组.结论：头皮及包皮组织来源的角质形成细胞可作为构建自体组织工程皮肤的表皮细胞来源.【关键词】角质形成细胞；细胞培养[Abstract]ATM:Toinvestigatethebiologicalcharacteristicsofkcratinocytcsderivedfromdifferentpartsofthehumanskinanddiscussanoptimalseedfortheconstructionoftissueengineer

3、edskin.METHODS:Thehumankeratinocyteswereharvestedfromthedifferentpartsofhumanmaleskinsuchasforeskin,scalp,trunkand1imbs(aged25・35years).ThekeratinocyteswereculturedinKSFMserumfreeculturemediuminvitro.Thegrowthkineticcharacteristicswerestudiedbycel1growthcurveandthe3HTdRincorporat

4、ionwasemployedtomeasuretheDNAmetabolism・Thecellcyclewasdeterminedwithf1owcytometry.RESULTS:FortheDNAmetabolismandcel1prolifcration,therewasnocleardifferencebetweenscalpandforeskingroups(P>0.05).Thesameresultsweregotfromtrunkand1imbsgroups(P>0・05)・Thedifferencewassignificantbetwee

5、nthegroupsofscalpandforeskinandthegroupsoftrunkand1imbs(Pv0・05)・ThepercentageofcelIsinSphaseofscalpandforeskingroupswasmuchhigherthanthatoftrunkand1imbsgroups.CONCLUSION:11mightbebetterlotakethekeratinocytesfromscalporforeskinastheseedingcellstoconstructthetissueengineeredskin・(K

6、eywords!keratinocytes;ccl1culture0引言大面积深度烧伤患者创面修复一直是烧伤治疗领域的难点，其原因主要是口体皮源严重不足.虽然组织工程皮肤的出现为解决这一难题带来了希望，但到n前为止还没有任何一种组织工程皮肤能作为合适的皮肤覆盖物，以满足临床上严重烧伤患者的需求[1].我们设想利用患者自体来源的皮肤细胞，在休外快速扩增并构建组织工程皮肤，来完成对创面的修复.在构建过程屮，人体哪些部位来源的表皮细胞更适合于作为种子细胞，则是本研究想要探讨的问题.1材料和方法1.1材料无血清培养液KSFM购自美国Gibco公司；Dispase

7、酶及胰蛋白酶购口美国Sigma公司；MTT购自华美生物工程公司；550型酶标仪购自美国BioRad公司；流式细胞仪购自美国BectonDickinson公司；3HTdR购H屮科院原子能物理研究所.头皮、躯干及肢体皮肤标本取自25〜35岁男性烧伤患者（烧伤总面积W30%,其lPIII度W10%）；包皮标本取自相同年龄段包皮环切术后.所有标本均经患者及家属知情同意.1.2方法1.2.1HKC的分组及体外培养细胞按所取部位分为头皮（scalp）、躯干（trunk）、肢体（limbs）及包皮（foreskin）4组.将所取标本剪成30mmX5mm皮条，置于2.5

8、g/Ldispase酶屮4°C消化过夜，剥离之表皮以0.01mmol/LPBS冲