四川部分猪场猪弓形体病的血清学调查.pdf

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1、畜禽养殖业ModernAnimalHusbandry疫病防弓台纵编＼Emaihnmgxmy2008@sina．corn李小兰，卜雨明谢平’胡世君1．西南大学动物科技学院，重庆北碚4007162．西南大学荣昌校区动物科技学院，重庆荣昌402460摘要：为了解四川部分猪场猪弓形体的感染情行弓形虫抗体检测，结果表明，受检的283份血清况．我们随机采集365份不同日龄猪血样，分离血样本．弓形虫抗体阳性171份，阳性率60．42％。由清．用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行抗体水平检上述资料可知，猪弓形虫感染在全国比较普遍，并测。结果

2、表明．受检的365份血清样本，检出猪弓形且感染率极高，给我国养猪业的发展和人民健康带体抗体165份．阳性率为45．21％，其中37日龄猪、来了严重的危害和威胁。60~70日龄猪、产仔母猪的阳性率分别为26．()8％、目前猪弓形体病的实验室检测一般采用直接26．67％、95．00％。表明猪场不同日龄的猪都有一定凝集试验(DAT)、间接血凝试验(IHA)、酶联免疫程度的弓形体感染，而母猪的感染率最高，养猪场吸附试验(ELISA)等方法检测弓形体抗体或抗原。应引起高度重视．以减少经济损失。其中，ELISA(酶联免疫吸附试验)具有灵

3、敏度高、特关键词：猪；弓形体；抗体；酶联免疫吸附试验异性强、重复性好，操作简便等优点，该方法已成为猪弓形体病又称弓浆虫病和毒浆虫病，是由艾当前诊断弓形体感染应用最广的技术。为了解现阶美耳科龚地弓形体引起的一种严重人畜共患原虫段四川部分猪场猪弓形体的感染情况，我们采用间病。临床常称为“无名高热”病，常以突然发病、高热接ELISA方法对不同日龄的猪血清进行抗体检稽留、呼吸及神经系统症状、皮肤发绀、妊娠母猪流测，现将结果报道如下。产、死胎、胎儿畸形等为其特征。剖检时肺、肝、淋巴1材料与方法结等脏器肿胀，有出血点和坏死灶，主要通过呼

4、吸1．1待检血清道、消化道、皮肤、胎盘等途径感染【1】。样品来源于四川部分猪场37日龄猪、60—701955年。我国于恩庶等【2】在福建首次从猪体内日龄猪和母猪．常规方法采血、分离血清，共获得分离到弓形体，以后全国各省市陆续有猪弓形体病365份猪血清。发病的报道。特别是近年来，该病在全国呈一定的1．2检测试剂流行趋势，感染率达30％～50％，致死率高达30％一猪弓形虫IgG抗体酶免检测试剂盒，购自重庆40％，有的甚至达到50％以上。本病常发生于6—8市动物检疫检测总站(珠海经济特区海泰生物制药月份，呈散发流行。傅斌等[31(

5、1993)应用滤纸干血有限公司生产，批号：20070903)。滴间接血凝试验调查山东省9个地区l5个县市的1．3仪器弓形虫感染情况，其中猪的阳性率为30．34％。杨廷酶标分析仪(DNM一9602编号YJ一026北京普忠等[412004年报道西宁地区猪弓形体病阳性率平朗技术有限公司生产)。均7．19％。据冼琼珍等[51人2006年报道广东省部分高速离心机(型号MM—1．金坛市正基仪器有地区送检血清弓形体感染平均阳性率为22．7％。限公司生产)。最高阳性率为71．4％。2007年江涛等同应用ELISA离心管、微量加样器、一次性注

6、射器。对湖北省部分猪场的弓形虫病进行血清学调查，平1．4分离血清均阳性率为35．2％。谭其军等1于2008年采用酶在四川I部分猪场随机选取不同日龄的猪只，分联免疫吸附试验对来自重庆17个区县的猪血清进别用一次性注射器前腔静脉采血5～10ml，置于消2010．们豳疫蒲1薯爹I弓台M。dernAnimalHusbandry业殖养禽畜组稿~Email：nmgxmy2008@sina．corn毒离心管中，凝固后静置12～24h，以lO000r／min离(5)充分甩净孔中液体，同上洗板3～5次，拍干心3-5min，分离血清，并进行编号

7、。然后加入万分后每孔滴加IOOulTMD底物溶液，37℃避光孵育l0之一的硫柳汞防腐，4~C冰箱保存备用。分钟，每孔加入50ul终止液终止反应，混匀后用酶1．5猪血清弓形体IgG的ELISA检测标仪在450nm处测定并记录样品和所有对照的(1)试剂盒置于室温放置20～30分钟，让试剂OD450值。盒中所有试剂恢复至室温。浓缩洗涤液在使用前用1．6结果判定蒸馏水进行10倍稀释。(1)以空白孔调零，450nm波长测定OD值。阴(2)将待检血清作l：100稀释：取洁净小管若性对照值≤0．20，临界对照OD值0．20～0．60，阳性

8、干，各加样品稀释液lml，用微量加样器依次加入对照值>0．60．证明实验成立。待检血清lOul，充分混匀。(2)按以下标准判断结果：(3)将板条固定于板架上，剩余的板条用不千阳性：样品OD值>临界对照OD值平均值×1．1。胶密封并放入密封袋中保存。每孔加入稀释后样品可疑：临界对照OD值平均