四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的形成.pdf

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1、肝脏2014年11月第19卷第1I期·839··论著·四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的形成郭杞兰黄月红陈治新王小众【摘要】目的观察四氯化碳(CC1)诱导的大鼠肝纤维化过程中肝窦毛细血管化的形成过程，探讨其与肝纤维化的关系。方法32只清洁级雄性SD大鼠，随机分为正常对照组，肝纤维化模型组，正常对照组大鼠腹腔注射0．9氯化钠溶液2mL／kg，模型组大鼠腹腔注射5OCO1一蓖麻油混合液2mL／kg，每周2次，共8周；分别于造模第2、4、6、8周处死大鼠，观察肝组织炎症及纤维化程度，放射免疫法检测血清中透明质酸(HA)的含量，透射电镜观察肝窦窦壁结构，S-P免疫组织

2、化学检测各组大鼠肝组织CD31、层黏连蛋白(LN)、IV型胶原(Col—IV)的表达。结果肝脏组织学证实CC1诱导的大鼠肝纤维化模型构建成功，6周可见纤维间隔形成；透射电镜显示，CCI诱导2周时，部分肝窦内皮细胞(1iversinusoidalendothelialcells，LSEC)窗孔减少，内皮下未见基底膜(Basementmembrane，BM)，随着造模的进程，LSEC窗孔进一步减少，部分甚至消失，第6、8周时局部肝窦内皮下形成连续的BM。同时，随着肝纤维化的进程，HA浓度逐渐升高，肝窦内皮细胞表面标志物CD31及基底膜主要成分Col—IV、LN表达逐渐增强

3、。结论在CC1诱导大鼠肝纤维化过程中，肝窦毛细血管化是逐渐形成的，LSEC失窗孔早于纤维间隔的形成，而肝窦内皮下基底膜出现在纤维间隔形成以后。【关键词】大鼠；肝纤维化；肝窦毛细血管化；肝窦内皮细胞；基底膜TheformationofsinusoidalcapillarizationintheprocessofliverfibrosisinducedbycarbontetrachlorideinratsGUOQi-lan，HUANGYue—hong，CHENZhi—xin，WANGXiao—zhong．DepartmentofGastroenterology，Union

4、HospitalofFujianMedicalUniversity，Fuzhou，350001，ChinaCorrespondingauthor：WANGXiao—zhong，Email：drwangxz@163．corn[Abstract]ObjectiveToobservetheformationofsinusoidalcapillarizationintheprocessofliverfibrosisinducedbycarbontetrachloride(CC14)inrats，andtoexploretherelevancebetweensinusoidal

5、capillarizationandhepaticfibrosis．MethodsThirty—twoSDratsweredividedrandomlyintocontrolgroup(groupN)andfibrosismodelgroup(groupM)．RatsingroupNweretreatedwith2ml／kgnormalsodiumtwiceaweekforeightweeksviaintraperitonealinjection，whileratsingroupMweretreatedwith2ml／kgamixtureof50CC14andcast

6、oroiltwiceaweekforeightweeks．Ratswereexecutedattheendof2wk，4wk，6wk，8wktocollectsamplesoflivertissueandserum．GradingandstagingofhepaticfibrosisweremeasuredbyHEstainingandmassonstaining．ChangesofHAfromserumweremeasuredbyradioimmunoassay．StructureofsinuswallinliversinusoidswasobservedbyTEM

7、．ExpressionsofCD31，LNandCol—IVinlivertissueweremeasuredbyS-Pimmunohistochemistry．ResultsLiverpathohistologyanalysisconfirmedthathepaticfibrosisratmodelinducedbyCC14wasestablishedsuccessfully．Fibrousseptumcouldbeobservedattheendof6thwk．TEMshowedthatfenestraeofsomeliversinusoidal