脱氢紫堇碱对高糖培养心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响.pdf

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1、·5O·ChineseJournaIofInformationonTCMOct.2014VoI.21No.1O脱氢紫堇碱对高糖培养心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响韩路拓’,杨佳妹’,任钧国,李鸿海,李军梅,刘建勋1.北京中医药大学,北京100029;2.中国中医科学院西苑医院,中药药理北京市重点实验室,北京100091摘要:目的观察中药延胡索主要有效成分脱氢紫堇碱(DHC)对高浓度葡萄糖培养的心肌成纤维细胞(CFs)增殖和胶原分泌的影响,为延胡索的临床应用提供实验依据。方法采用体外高糖培养的CFs模型进行实验。以胶原

2、酶与胰蛋白酶联合消化分离出生24h内乳鼠CFs,取2~4代细胞高浓度葡萄糖(25mmol/L)培养,分别加入100、50、25mg/LDHC干预,24、48h后镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA测定I型、III型胶原含量。结果CFs种植3h后开始贴壁生长,高浓度葡萄糖培养液培养24、48h后细胞增殖明显增加(P

3、殖(P

4、rationandCollagenSecretionofCardiacFibroblastsCulturedbyHighGlucoseHANLu.tuo,,YANGJia.mei'。,RENJun.guo,LIHonghai,LIJun—mei,LIUJian-xunf1.BeijingUniversityofChineseMedicine.Beijing100029,China:2.XiyuanHospitalMedicalofChinaAcademyofChineseSciences,KeyLaboratoryof

5、PharmacologyofChineseMateriainBeijing,Beijing100091,China)Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsofdehydrocorydaline(DHC)onproliferationandcollagensecretionofcardiacfibroblasts(CFs)culturedbyhighglucose:ToprovideexperimentalevidenceforclinicalapplicationofRhizomaC

6、orydalis.MethodsCFsculturedinvitrowithhighglucoseweremadeintomodels.CollagenaseandtrypsinwereusedforthecombinedigestionofCFsfromratsbornin24h.2-4generationCFswereculturedbyhighglucose(25mmol/L】,andthen100,50,25mg/Ldethydrocorydalinewasaddedforintervention.Cellul

7、armorphologyofCFswasobservedafter24,48h.CFsproliferationwasdetectedbyMTTmethod.Cellcyclewasassessedviaflowcytometry.ThelevelsofcollagenIandcollagenII1weredeterminedbyELISA.ResultsCFsbegantogrowadherence3hoursafterplanting,andCFsculturedbyhighglucosesignificantly

8、proliferated24,48hlater(P

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