神经系统疾病的免疫学检测指标及临床意义.ppt

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1、神经系统疾病的免疫学检测指标及临床意义首都医科大学附属天坛医院神经内科张星虎内容免疫学诊断方法介绍各种神经系统疾病的免疫学检测指标神经系统感染性疾病神经系统免疫性疾病副肿瘤综合症系统性免疫性疾病免疫学诊断的相关概念结果表示：定性、半定量、定量效价或滴度（titer）敏感性：某种检测方法显示的阳性例数/所检测的确定诊断的病例数特异性：某种检测方法显示的阴性例数/所检测的无关病例数假阳性：1-特异性假阴性：1-敏感性免疫学诊断方法检测靶点特异性抗原特异性抗体检测方法沉淀试验补体结合试验凝集试验免疫荧光试验酶联免疫吸附试验放

2、射免疫检测核心：抗原与特异性抗体结合，通过示踪剂（核素、酶反应、荧光素等）显示反应结果免疫沉淀试验用于特异性抗原检测原理：抗原在碱性缓冲液中带负电荷，在电场中向正极移动，而抗体由于接近等电点，借内渗液流作用缓慢移向负极，在一定的时间内，二者会聚，形成沉淀线。补体结合试验用于检测特异性抗原或抗体。原理：利用抗原-抗体结合后能够吸附和激活补体的特性。第一步用已知的抗原（抗体）加入待测的抗体（抗原），加入补体。第二步羊红细胞及相应抗体的指示系统，如存在未知的抗体（或抗原）则吸附补体，后加入的指示系统缺乏补体而不溶血，否则，产

3、生溶血。凝集试验大颗粒抗原与相应抗体相结合，形成可见的凝集复合物。分类：细菌凝集反应、直接血细胞凝集反应、间接血细胞凝集反应、反相血凝、协同凝集、乳胶凝集反应间接血凝：先将特异性抗原吸附于绵羊红细胞上，加入待测样本，如果样本中含有特异性抗体，就会与羊红细胞上的抗原结合，使羊红细胞产生凝集反应。免疫荧光试验用荧光色素标记已知的抗体或抗原，在特定条件下用标记物浸染标本，使标记的抗体或抗原与待测的抗原或抗体结合，用荧光显微镜观察形成的抗原抗体复合物。酶联免疫吸附试验（ELISA）原理：将已知的抗原或抗体吸附于固相载体上（包被

4、），加入待测样本使抗原抗体特异性结合，加入酶标抗体，通过酶促反应作用于特定的底物，产生成色反应，通过酶标仪测定结果。分类：间接法、双抗体夹心法、竞争法特点：操作简便快速、敏感性及特异性高ELISA(Enzyme-linkedimmunosorbantassay)抗原+抗体抗体抗原抗体抗原+酶标二抗抗原抗体酶复合物+底物放射免疫法原理：同位素标记抗原和非标记抗原对已知特异性抗体的竞争抑制反应。神经系统感染性疾病的免疫学诊断单纯疱疹病毒性脑炎细菌性脑膜炎结核性脑膜炎隐球菌脑膜炎脑囊虫病神经梅毒AIDS单纯疱疹病毒性脑炎CS

5、FHSV抗体阳性判定标准滴度达1：80以上血与CSF抗体比小于40CSF抗体有4倍以上升高TORCH弓形虫（Toxoplasma）风疹病毒（Rubella Virus）巨细胞病毒（Cytomegalovirus）单纯疱疹病毒（Herpessimpiex Virus）细菌性脑膜炎指标：细菌抗原检测方法：对流免疫电泳、乳胶凝集试验、放射免疫法及ELISA等临床不常用结核性脑膜炎指标：结核抗体检测方法：ELISA法检测检测的敏感性、特异性与所用的方法以及所用的抗原特异性有关。常用的抗原：PPD新型隐球菌脑膜炎CSF隐球菌荚膜

6、多糖抗原检测脑囊虫病囊虫抗体检测：方法：ELISA、IHA、IF、LA等阳性率80％以上，特异性90％以上两种方法联合可提高阳性率CSF抗体检测更有意义，血清抗体只能说明体内有过感染或正在感染囊虫抗原检测ELISA可用于诊断及疗效评价神经梅毒非特异性：VDRL、RPR、USR特异性：TPHA、FTA-ABSVDRL(VenerealDiseaseResearchLaboratory)抗原与抗体（反应素）反应，加入卵磷脂加强心磷脂的抗原性，加入胆固醇增强抗原的敏感性优点特异性较高，用于诊断神经梅毒的特异性为100%，美国

7、CDC诊断标准提到若CSF－VDRL实验(+)，即可诊断神经梅毒缺点敏感性仅为27%，特别是在无症状神经梅毒中仅10%。抗原需要灭活，试剂需临时配制，需要显微镜，目前多用改良RPR实验代替。USR(unheatedserumreagin)应用改良的VDRL抗原优点抗原不需灭活，操作时间短缺点借助显微镜观察RPR(rapidplasmareagin)与USR原理相似抗原结合在活性炭上，出现肉眼可见的凝聚颗粒优点抗原不需灭活，不需临时配制，不需显微镜缺点较VDRL易出现假阳性TPHA(treponemapallidumha

8、emagglutinationassay)可溶性螺旋体抗原与绵羊红细胞结合血清抗体与致敏红细胞结合显示凝聚反应敏感性及特异性高FTA-ABS(fluorescenttreponemalantibodyabsorbancetest)抗原吸附于玻片再加血清（抗体）加入荧光素标记的抗人IgG显微镜观察诊断准确性高，假阳性低各种梅毒检测方