晚期糖基化终产物对脂肪细胞产生活性氧的诱导作用及其机制.pdf

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1、广东医学2014年1月第35卷第1期GuangdongMedicalJournalJan．2014，Vo1．35，No．1·39·晚期糖基化终产物对脂肪细胞产生活性氧的诱导作用及其机制术张瑛，夏学颖，胡丽莉，关小倩，邹和群南方医科大学第三附属医院肾内科，肿瘤科(广州510630)；广东省妇幼保健院整形美容外科(广州510010)。南昌大学第二附属医院肾内科(南昌330006)【摘要】目的观察晚期糖基化终产物(AGEs)对脂肪细胞产生活性氧(ROS)的影响及机制。方法3T3一L1前脂肪细胞体外培养并诱导分化为成熟的脂肪细胞，以小鼠血清白蛋白(MSA)作

2、为阴性对照，用不同浓度(25、50、100g／mL)AGEs共同孵育不同时间(0、5、15、30min及1、3h)后，荧光探针2，7一二氯荧光素乙二酯测定细胞ROS生成水平，间接反映ROS的产生量。分别应用酶特异性抑制剂预处理脂肪细胞，观察AGEs—MSA刺激脂肪细胞生成ROS的变化。结果AGEs能诱导脂肪细胞产生ROS，ROS的产生量随MSA氧化程度的升高和AGEs—MSA浓度的增加而增多。AGEs诱导脂肪细胞产生的超氧阴离子能被NADPH氧化酶的阻断剂DPI和apocynin明显抑制，不能被其他酶的阻断剂所抑制。结论AGEs能够诱导脂肪细胞产生R

3、OS，其部分机制可能与NADPH氧化酶激活有关。【关键词】晚期糖基化终产物；活性氧；NADPH氧化酶；脂肪细胞Advancedglycosylationendproductsinduceproductionofreactiveoxygenspeciesinadipocytesandthemecha-nism．ZHANGng，XIAXue—ying，HULi—li，GUANXiao—qian，ZOU日—qun．DepartmentofNephrology，TheThirdAffiliatedHospitalofSouthernMedicalUniver

4、sity，Guangzhou510630，ChinaCorrespondingauthor：ZOU月e—qun．E—maif：Zouhequn@hotmail．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatethemechanismofadvancedglyeosylationendproducts(AGEs)inducingtheproductionofreactiveoxygenspecies(ROS)inadipocytes．MethodsThe3T3一L1adipocyteswereculturedanddiferent

5、iatedintomatureadipoeytesnvitro．Culturedadipocyteswereincubatedwithindicatedconcentrations(25．5Oand100mL)ofAGEs—modifiedmurineserumalbumin(MSA)for1h，ortreatedwith100mg／mLofAGEs—MSAfortheindicateddurations(0，5，15，30，60and180min)．TheproductionofROSwasdeterminedbyfluorescenceprobe

6、DCFHDA．ToclarifytheunderlyingmechanismofAGEs—inducedROSproduction，adipocyteswerepreincubatedfor1hwiththeinhibitorsofvariousenzymaticsystemsinvolvedinROSgeneration．ThechangesofROSproductionweredetected．ResultsComparedwithcellsincubatedwithmediumaloneornativeMSA，AGEs—MSAinducedRO

7、Sproduc—tioninadipocytesintime—anddose—dependentmanners，andthequantityofROSincreasedwiththeoxidationdegreeofMSA．TheAGEs—triggeredROSgenerationwassignificantlysuppressedbypretreatmentwithapocyninandDPI，thein—hibitorsofNADPHoxidase；butnottheotherinhibitors．ConclusionAGEs—MSAinduc

8、esROSproductioninadipo—cytes，partiallymediatedbyNADPHo