皮蛋地微生物菌相检测.doc

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1、皮蛋的微生物菌相检测摘要:本实验目的是检测各种品牌皮蛋中的微生物菌落是否符合国家食品卫生标准。结果表明,皮蛋中主要含有酵母菌、细菌、乳酸菌和放线菌;其中洞庭湖皮蛋、光阳皮蛋、鲁星皮蛋、鸟王皮蛋、蛟龙皮蛋符合国家标准;每克三湖松花皮蛋、湖鸭松花皮蛋和福庆成皮蛋中的细菌数超标,不符合国家食品卫生标准;每克湖鸭松花皮蛋中的菌落总数超标,不符合国家食品卫生标准。关键词:皮蛋;细菌;酵母菌;放线菌;菌落总数目录前言11实验方法11.1设备和材料21.1.1实验材料21.1.2试剂21.1.3主要实验仪器21.2牛肉膏蛋白胨培养基配

2、制21.2.1配方及配量31.2.2配制步骤31.3操作步骤31.3.1检样稀释及培养31.3.2浇注平板31.3.3倒置培养31.4菌落计数的原则31.5菌落的计算方法42结果和分析42.1不同品牌皮蛋中酵母菌菌落检测结果42.2不同品牌皮蛋中疑似乳酸菌菌落的检测结果52.3不同品牌皮蛋中细菌菌落检测结果52.4不同品牌皮蛋中放线菌菌落的检测结果52.5不同品牌皮蛋中菌落总数的检测结果63结论6参考文献7致9前言皮蛋拥有众多名称,如松花蛋、变蛋等,是我国具有悠久历史的一种风味蛋制品,不仅受到国消费者的青睐,在国际市场上

3、也享有盛名。皮蛋,不但是种美味食品,而且还可以作为药用。中医认为皮蛋性凉,可以用来治疗眼睛疼、牙齿疼、高血压、耳鸣眩晕等疾病。为了检测其是否符合国家食品卫生标准,我们用最简单的方法对皮蛋微生物菌群进行生物检测[1]。最常有的检验微生物菌群的方法是浇注平板法[2],它是将待分离的试样用缓冲液做梯度系列稀释后,在无菌环境中将几个合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中,然后立即倾入融化的培养基,经充分混匀后,置于适宜温度下培养。最后可以从其层和表面出现的许多菌落中,根据菌落形态进行计数并进一步纯化的方法。该法不仅可以用于菌种的

4、分离纯化,还可以用于菌落计数[3]。菌落形态是判断微生物种类的主要依据[4]。在固体培养基表面形成的酵母菌的菌落一般都有较易区分的特点,比如菌落表面较光滑、较透明、较湿润、容易挑起、颜色均一及菌落质地均匀等,但由于酵母菌具有细胞体积较大以及不能在固体培养基中移动等特点,所以在培养基上的表现就是菌落较厚、较大和外观较稠[5]。此外,酵母菌菌落的色彩一般较单一,大多数都呈乳白色。可以利用乳糖、葡萄糖等发酵性糖,并使这些发酵性糖转变成乳酸的无芽孢、革兰氏染色呈阳性的细菌称为乳酸菌。常见的乳酸菌反应在宏观上上表现为个体较小的圆形

5、菌落,直径大约1~3mm,微微隆起,表面较光滑等特点,颜色多数呈现乳白色,且生长缓慢[6]。霉菌是真核生物中的一种,菌落是由分支状菌丝体组成,形成的菌落在培养基上主要表现为外观干燥、不透明、较大、较疏松、形态多样以及菌落不易被挑起[7]。某些霉菌的菌丝生长很快,且随着年龄的增长会形成具有一定形状、结构和不同颜色的孢子,所以霉菌往往很容易鉴别。细菌因其是单细胞生长,所以细胞较小,故形成的菌落一般也较小、较湿润、较薄、较透明、易挑起并较“细腻”。不同的细菌还会产生不同的色素,形成不同颜色的菌落。有的细菌还会在生长过程中产生较

6、多有机酸或着蛋白质分解物,这使得菌落常常有一股酸败味或腐臭味。放线菌菌落均有形态较小,菌丝细而致密,表面呈粉状。色彩较丰富,不易挑起以及菌落边缘的培养基出现凹陷状等特征。1实验方法1.1设备和材料1.1.1实验材料实验材料表品牌名生产商福庆成皮蛋市福庆成食品鸟王松花皮蛋神丹健康食品特产洞庭湖皮蛋洞庭湖公司湖鸭松花皮蛋荆江蛋业三湖松花皮蛋高邮市三湖蛋品鲁星皮蛋鲁星蛋业蛟龙松花鸭皮蛋蛟龙食品光阳皮蛋光阳蛋业股份1.1.2试剂试剂表试剂名生产商琼脂粉亚化工产品盐酸化学试剂厂氯化钠化学试剂厂胰蛋白胨微生物试剂牛肉膏梁山科鑫生物制

7、品氢氧化钠恒邦化工科技1.1.3主要实验仪器主要实验仪器表仪器型号制造商超净工作台SW-CF博讯实业电热鼓风干燥箱9070MBE博讯实业立式压力蒸汽灭菌锅YXQ-LS-SII博讯实业恒温水浴锅HH-S6恒睿仪器设备制造恒温恒湿培养箱LHP-160L恒睿仪器设备制造1.2牛肉膏蛋白胨培养基配制1.2.1配方及配量牛肉膏0.3g,琼脂粉1.5g,蛋白胨1g,NaCl0.5g,水100mL,pH7.2~7.4。1.2.2配制步骤按照培养基配方及其所需用量分别称取各药品。在烧杯中加入少量水,将各培养基成分(琼脂粉除外)逐个加入水

8、中待溶。将烧杯放于石棉网上,将电炉调至小火加热。用玻璃棒不断搅拌,使各药品快速溶解,然后添加蒸馏水至配制培养基所需的量。此时配好的是微酸性的培养液,因此要用1mol/LNaOH调节培养液pH至7.2~7.4。取250mL三角瓶若干,分别装入上述配制好的培养液150mL,然后每瓶中加入琼脂粉2.2~2.3g,待灭菌。将

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