【赢在起点】2013届高考生物一轮复习 第十一单元 DNA和蛋白质技术学案.doc

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1、第十一单元生物技术实践学案61DNA和蛋白质技术考纲要求1.蛋白质的提取和分离实验与探究2.PCR技术的基本操作和应用实验与探究复习要求1.根据蛋白质分子的特点,选择不同的方法提取和分离2.PCR技术的原理和条件3.PCR技术的基本操作基础自查一、血红蛋白的提取和分离1．凝胶色谱法：。2．电泳(1)概念：。(2)特点：。3．实验操作(1)样品处理：。(2)粗分离：。(3)纯化：。(4)纯度鉴定：。二、PCR技术扩增DNA片段1．PCR技术(1)PCR：的简称，是一种的技术。(2)扩增方向：。(3)引物特点：，能，用于PCR的引物

2、长度通常为20～30个脱氧核苷酸。(4)原理：。(5)条件：。2．过程(1)变性：。(2)复性：。(3)延伸：。3．结果：。课堂深化探究一．多聚酶链式反应扩增DNA片段1．细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR技术)的比较细胞内DNA复制PCR不同点解旋酶引物能量温度子链合成相同点2.PCR反应的过程及结果(1)PCR反应过程：①变性：②复性：③延伸：(2)结果：特别提醒　DNA复制需要引物的原因：DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。二、血红蛋白的提取和分离1．方法及原理方　法原　理凝胶色谱法电

3、泳法2.实验操作程序(1)样品处理(2)粗分离④图示：⑤注意：透析时间为12h。透析袋是用硝酸纤维素制成，小分子可自由进出，而大分子保留在袋内。(3)纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。(4)纯度鉴定：一般用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。3．结果分析与评价项　目分　析血液样品的处理分层明显→→凝胶色谱柱的装填血红蛋白的分离特别提醒　①用凝胶色谱法分离和纯化蛋白质，滴加样品时，吸管管口贴着管壁环绕移动加样，同时注意不要破坏凝胶面。②在蛋白质分离过程中，应仔细观察红色区

4、带在洗脱过程中的移动情况，如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。对应训练1.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历30多次下述循环：95℃条件下使模板DNA变性、解链→55℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是(　　)。A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4

5、种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制相比，其所需要酶的最适温度较高2.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。回答以下问题：(1)细胞内DNA复制过程中，引物的作用是__________，而且DNA复制的前提是__________。(2)PCR利用了__________原理，可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。(3)PCR技术用到的酶是__________，与细胞内DNA复制时发挥相同作用的酶相比区别在于__________。(4)下

6、面表格是DNA体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过比较分析，请推导出PCR反应合成DNA子链时能量来源于______________。原　料ATPDNA体内复制四种脱氧核苷酸需要PCR反应脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸不需要(5)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性，且引物不被切除，则经过n次循环，具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为__________。3.如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题。(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红

7、细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是________；乙装置中，C溶液的作用是________________________________________________________________________。(3)甲装置用于________，目的是________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫________，是根据________________分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时，待________时，用试管收集流出液，每5mL

8、收集一管，连续收集。4.下列关于血红蛋白分离中样品处理及粗分离的描述，错误的是(　　)。A．红细胞洗涤：此操作的目的是去除红细胞内的杂蛋白B．血红蛋白释放：此操作需要将洗涤好的红细胞放入蒸馏水中C．分离血红蛋白溶液：离心后红色透明液体是血红蛋白的水溶液D．透析：