2017版高考生物一轮复习 第十单元 生物技术实践 第34讲 微生物的利用和酶的应用讲义 浙科版.doc

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1、第34讲微生物的利用和酶的应用[考试标准]知识内容加试要求一、微生物的利用1.大肠杆菌的培养和分离2.分离以尿素为氮源的微生物掌握程度参考本考试标准中的：二、(二)3.实验与探究能力二、酶的应用3.果汁中的果胶和果胶酶4.α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测考点一　大肠杆菌的培养和分离1．培养基与无菌技术(1)培养基的成分和分类①微生物的营养：碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。②培养基的类型：a．按物理性质分：固体培养基、半固体培养基、液体培养基。b．按目的用途分：鉴别培养基、选择培养基。(2)消毒和灭菌的区别项目条件结果常用的方法消毒较为温和的物

2、理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2.细菌两种分离方法的比较项目划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体，即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的

3、菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落特点方法简单，但不适宜计数单菌落更易分开，但操作复杂些目的使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落3.大肠杆菌的培养和分离(1)大肠杆菌①特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。②细菌的繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。(2)细菌的扩大培养扩大培养用LB液体培养基，划线分离用LB固体平面培养基。(3)分离培养基灭菌倒平板接种划线分离培养观察50mLLB液体培养基和50mLLB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌将培养基分别倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，

4、使之形成平面在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿培养皿倒置(盖在下面)，放在37℃恒温培养箱中培养12～24h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落[诊断与思考]1．判断下列叙述的正误(1)培养基分装到培养皿后进行灭菌(　×　)(2)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(　×　)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(　√　)(4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接

5、种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(　×　)(5)下图中甲为划线分离法中最重要的环节，乙为操作的结果：①每一次划线后都要将接种环灼烧(　√　)②除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端(　×　)(6)用涂布分离法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(　√　)2．如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考：(1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？提示　获得效果A的接种方法为涂布分离法，获得效果B的接种方法为划线分离法。(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片

6、，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？提示　最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。题组　大肠杆菌的培养和分离1．检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)要测定饮用水中大肠杆菌的数量，常采用________法，通常将水样进行一系列的梯度__________________，然后将上述的水样用玻璃刮刀分别涂布到______________________的表面进行培养，记录菌落数量。用该方法统计样本菌

7、落数时________(填“是”或“否”)需要对照组。原因：_______________________________________________________。(2)下面所示的四种菌落分布图中，不可能由上述方法得到的是________。(3)大肠杆菌的培养条件是无菌，培养基配制时需加入氯化钠，以维持__________。配制培养基时先__________________(填“调节pH”或“灭菌”)后________(填“调节pH”或“灭菌”)。答案　(1)涂布分离　稀释　LB固体培养基　是　因为需要判断培养基使用之前是否被杂菌污染(培养

8、基灭菌是否合格)　(2)D　(3)渗透压　调节pH　灭菌2．请回答下列有关细菌的培养与分离问题。(1)环卫部门要检测某地饮