高三生物教学资料 微生物的分离与培养活动导学案 .doc

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1、<<微生物的分离与培养>>活动导学案【活动目标】：1、了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术2、利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数3、简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物；掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术【活动重点】1、培养基的成分，类型，消毒和灭菌的区别2、运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。3、从土壤中分离某种特定微生物的操作技术，探讨微生物的利用。【活动难点】：1、运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。2、纤维素酶的组成及作用3、研究培养基对微生物的选择作用【活动

2、方案】：活动一、培养基与无菌技术1、培养基对的营养构成：一般都含有水、__________、氮源、无机盐，还要满足微生物生长对pH、________________以及O2的要求。2、类型：3、消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌例题：配制培养基的叙述中，正确的是A．制作固体培养基必须加入琼脂B．加入青霉素可得到放线菌C．培养自生固氮菌不需氮源D．发酵工程一般用半固体培养基活动二、微生物培养的基本技术1、配制培养基2、灭菌:3、接种(1)接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。(2)接种工具：包括____________、

3、涂布器。(3)接种方法：平板划线法、____________________法。(4)注意事项：整个操作过程要在____________旁完成。4、培养接种后的培养皿放入恒温箱内培养。5、纯化大肠杆菌(1)微生物接种的最常用方法是和。(2)平板划线法：通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种。(3)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得。活动三、分离与计数土壤中分解尿素的细菌的实验1．菌种筛选(1)培养基：_______培养基。(2)特点：________是唯一氮源。2．统计菌落数目(1)计算方法：①直接计数法；

4、②间接计数法。(2)平板计数公式：每克样品中的菌株数＝__________________3．分离分解尿素的细菌的实验设计原则(1)设立重复组原则统计某一稀释度下的平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，来增强实验结果的说服力与准确性。(2)对照原则：对照实验的概念：除了被测试条件以外，其他条件都相同的实验。主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响。提高实验的可信度。例如为了确认培养基是否被杂菌污染，需以培养基培养作为空白对照。①断培养基中是否有杂菌污染，需将的培养基同时进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养

5、基上的菌落数目，进行对比得出结论。4.分解尿素的细菌的鉴别(1)在培养基中加入指示剂，则培养基会变红；(2)检测的变化来判断是否存在。例题：分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是①加尿素　②不加尿素　③加琼脂　④不加琼脂　⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦活动四、纤维素和纤维素酶纤维素分解菌的筛选1、纤维素：是____类物质，广泛存在于自然界，如棉花、木材、作物秸秆等。2、纤维素酶：(1)纤维素酶是一种________酶。(2)三种组分：________、CX酶和葡萄糖苷酶。(3)作用结果：最终将纤维素分解成__

6、________。在下面的反应式中填写相应的酶：纤维素纤维二糖葡萄糖3、纤维素分解菌的筛选方法：法。筛选原理：刚果红可以与纤维素形成，当纤维素被分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现我们可以通过来筛选纤维素分解菌。活动五、分离土壤中纤维素分解菌实验操作1．分离纤维素分解菌的实验设计(1)实验流程：土壤取样→(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别的培养基上→挑选产生的菌落。(2)土壤取样：采集土样时，可以选择的环境。(3)选择培养：①目的：增加纤维素分解菌的，确保能够从样品中分离到所需要的。②选择培养：称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形

7、瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养1～2d，直至培养液变。也可重复选择培养。③挑选菌落a．刚果红染色法，挑选的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先，再加入进行反应，另一种是在时就加入刚果红。例题：在加入刚果红—纤维素的培养基中出现透明圈的菌落是A．分解尿素的细菌B．硝化细菌C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌【课后作业】：1．PCR是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，所需要的酶是从什么菌中提取的①Taq细菌②芽孢杆菌③火球菌④病毒A．①