高三生物教学资料 DNA的粗提取与鉴定活动导学案 .doc

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1、《DNA的粗提取与鉴定》活动导学案【学习目标】：通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。【重点难点】：DNA粗提取以及DNA鉴定的原理【活动方案】：活动一：基础知识梳理：1.提取DNA的基本思路是：选用一定的或方法分离具有不同或的生物大分子。2．原理：利用ＤＮＡ与、和等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。（1）DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使充分溶解，而使杂

2、质沉淀，或者相反，以达到分离目的。当NaCL的浓度为　　　　　，ＤＮＡ的溶解度最小，而析出。（2）酒精溶解：DNA不溶于溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。（3）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解，但是对没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解，但对DNA没有影响。（4）DNA的鉴定在条件下，DNA遇会被染成色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。活动二、实验设计：1、实验材料的选取凡是含有的生物材料都可

3、以考虑，但是选用的生物组织，成功的可能性更大。2、破碎细胞，获取含DNA的滤液以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的，同时用搅拌，过滤后收集滤液即可。如是植物细胞，需要先用溶解细胞膜。如提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的和　　，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。3、去除滤液中的杂质（１）方案一：利用ＤＮＡ在不同浓度的　　　　溶液中溶解度不同。（２）方案二：直接在滤液中加入　　　　　，反应１０~１５分钟，因为木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。（３）方案三：将滤液放在　　　　　　　　　　　保温　　　　　分钟

4、。4、DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积、冷却的，静置，溶液中会出现，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4ml的。混合均匀后，将试管置于中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变。活动三、操作提示1、以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g，防止。2、加入洗涤剂后，

5、动作要、，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要，以免，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要，否则会影响鉴定的效果。4．提取鸡血中DNA时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？【反馈练习】：1.下列有关“利用菜花进行DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述中，正确的是A．采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分蛋白质等杂质  B．在切碎的菜花中加入一定量的蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液 C．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0．14mol／L，滤去析出物

6、 D．将白色丝状物溶解在2mol／LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色2.某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热3.下表为某生物兴趣小组利用鸡血细胞进行DNA粗提取与鉴定的实验过程：①。②。④。⑥。⑦。【课后作业】：1．在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是A.除去血浆中的蛋白质B.除

7、去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯2．洗涤剂能够瓦解（），但对DNA没有影响。A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质3．在物质的提取过程中常使用合适的溶剂来溶解所需提取的物质。下表各选项中的物质不溶于对应溶剂的是选项物质溶剂A叶绿体中的色素无水乙醇B细胞膜中的脂质丙酮C细胞中的DNA2mol/L的氯化钠溶液D红细胞中的血红蛋白甲苯4．下列对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是A．利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DN

8、A与蛋白质分离B．利用85℃的高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离C．利用DNA在0.14mol·L－1NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA与杂质分离D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离5.下列实验过程中，出现的正常现象有A．制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B．用果酒制作果醋过程