行业标准：DB23∕T 2374-2019 马铃薯胞囊线虫田间调查技术规范.pdf

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1、ICS65.020.01B15DB23黑龙江省地方标准DB23/T2374—2019马铃薯胞囊线虫田间调查技术规范2019-06-05发布2019-07-04实施黑龙江省市场监督管理局发布DB23/T2374—2019前言本标准依据GB/T1.1-2009的规则编写。本标准由黑龙江省农业农村厅提出。本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：黑龙江省农业科学院马铃薯研究所。本标准主要起草人：王文重、闵凡祥、胡林双、高云飞、杨帅、魏琪、董学志、郭梅、宿飞飞。IDB23/T2374—2019马铃薯胞囊线虫田间调查技术规程1范围本标准规定了

2、马铃薯胞囊线虫田间调查的土壤取样、分离、鉴定和结果判断方法。本标准适用于马铃薯胞囊线虫田间调查。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1马铃薯胞囊线虫马铃薯胞囊线虫（potatocystnematode）包括马铃薯白线虫（Globoderarostochiensis）和马铃薯金线虫（Globoderapallida），属于线虫门（Nemata）、侧尾腺纲（Secernentea）、垫刃目（Tylenchida）、异皮线虫科（Heteroderidae）胞囊线虫属（Heterodera)，是马铃薯作物上最重要的病害之一。对马铃薯根部、匍匐茎和块

3、茎造成伤害，症状主要表现为坏死，影响根部生长，阻碍养分吸收，降低马铃薯产量和商品性。3取样时间和方法3.1取样时间每年在马铃薯播种前或收获后，对马铃薯田土壤进行随机取样。3.2调查地块根据当地不同土壤类型选择有代表性的地块进行调查，每块面积不得小于6670m2。3.3调查方法取样时首先填写表1。表1马铃薯胞囊线虫田间调查表取样地点取样时间土壤类型填表人样品编号调查面积（m2）前茬作物备注2DB23/T2374—2019取样时先去除3cm~5cm的表土，然后利用土壤取样器采集土壤样品。由于马铃薯属于垄作，所以取样时取距地面15cm~20cm的根部土壤

4、。采用对角线五点取样法，每个地块可取5个取样点，每个取样点挖取根围土作为1个小样，每个小样100g，然后将其混合成一个500g的混合样。写好标签，将样品装入取样袋中。取样时应在土壤湿润时进行，避免在土壤浸水时取样。4分离和鉴定4.1样品分离将取回的土壤样品平铺在干净的浅瓷盘内，自然干燥，去除土壤中的植物组织和粗砂等杂质后，称取100g土壤样品备用。采用胞囊漂浮器分离法，分离时先将漂浮筒注满水，将干燥后的100g土壤样品放在上筛中，用强水流冲洗至全部土样到漂浮筒内，胞囊和草屑等浮在水面并溢出，经环颈水槽流到底筛中，用清水反复冲洗底筛，将底筛中的漂浮物

5、倒在铺有滤纸的漏斗中过滤，胞囊留在滤纸上。将晾干后的滤纸放于解剖镜（8倍~10倍）下检查，寻找胞囊。发现胞囊后用小毛刷收集胞囊。4.2样品制作将胞囊线虫的胞囊在培养皿内浸泡24h，用尖头镊子将浸过的胞囊移至载玻片的水滴中，在体视显微镜（10倍~90倍）下用解剖刀切下胞囊后部的阴门椎部分。用挑针清除阴门椎内附着物，用刀适当整理阴门椎边缘，使其高度不超过阴门窗区域宽度的10倍~15倍。将切下的阴门椎用40%的H2O2处理数分钟，阴门椎依次移至载玻片的另一侧的70%、95%、100%酒精液中脱水。取适量固体状的中性胶涂至凹槽的载玻片中，在酒精灯上加热至胶

6、溶化，将处理好的阴门埋于胶内，注意操作时一定摆正阴门椎使其顶端向上，加入刷子毛作支撑物，盖上盖玻片，贴好标签。4.3样品鉴定制作胞囊线虫阴门锥玻片。最后生物显微镜（100倍~1000倍）下观察胞囊和阴门锥形态特征。参见附录A，对马铃薯胞囊线虫形态进行鉴定。5结果判断符合4.3形态鉴定特征可判定是否分离到马铃薯金线虫和马铃薯白线虫，最后将结果汇入表2，判断该地区是否存在马铃薯胞囊线虫。表2马铃薯胞囊线虫田间调查情况及结果表结果样品编号取样时间备注马铃薯金线虫马铃薯白线虫+：表示有；—表示没有A3DB23/T2374—2019附　录　A（资料性附录）马

7、铃薯胞囊线虫形态特征A.1马铃薯白线虫学名：Globoderarostochiensis异名：Heteroderaschachtiirostochiensis；H.schachtiisolani；H.rostochiensis英文名：Potatocystnematode；Whitepotatocystnematode分类：线虫动物门（Nematoda），侧尾腺口纲（Secernentea），垫刃目（Tylenchida），异皮线虫科（Heteroderidae），球胞囊属（Globoder）。形态学特征：成熟雌虫呈白色，死后变为褐色、有光泽，有些种

8、群在变成褐色之前要经过3~4周的米黄色阶段。虫体近球形，有一个突出的颈和头部；末端钝圆、无阴门锥，角质层有网状花纹；头架骨