高中生物 第一章 无菌操作技术实践 1.1 微生物的实验室培养二教案（选修1）.doc

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1、第一章无菌操作技术实践1.1微生物的实验室培养二教学目标：1、知识与技能：研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定，常用的分离、培养微生物的固体培养基2、过程与方法：通过分离、培养微生物，掌握分离技术3、情感态度价值观：培养学生探究生物的热情。教学重点：对土样的选取和选择培养基的配制。教学难点：对分解尿素的细菌的计数教学方法：实验、合作、探究教具使用：菌种，实验仪器共案部分个案部分教学过程教师主导活动学生主体活动课前：安排学生预习：预习提纲（见导学案）课前检查预习情况。学生根据预习提纲进行自学。课中：活动一：对

2、上节课内容进行回顾，作业中存在的问题进行探讨。活动二：阅读教材，归纳总结微生物的分离与纯化：(1)实验原理：(2)材料用具：(3)方法步骤：①稀释：②划线或涂布：【问题讨论】问题1：如何判断选择培养基是否起到了选择作用?提示：制备牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，将稀释相同倍数菌液分别涂布在牛肉膏蛋白胨和选择培养基上，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长菌落数目明显多于选择培养基上的数目，用来判断选择培养基起到了选择作用。问题2：以尿素作为惟一氮源培养基，是否意味在这个选择培养基上生长都是分解尿素微生物?如何进行验证?活动三：学生活动一

3、：上节存在问题总结。学生活动二：阅读教材15-20页归纳总结微生物的分离与纯化：(1)实验原理：(2)材料用具：(3)方法步骤：①稀释：②划线或涂布：并动手实验。问题讨论：1.2分小组讨论问题。1-41．什么叫菌落?什么是菌苔?各种微生物形成的菌落表观特征有哪些?2．最常用的分离、培养微生物的固体培养基是什么?3．常用的平板分离法有哪几种?采用各种平板分离法的目的是什么?4．微生物的分离包括哪几个步骤?结合教材图1—20说明用涂抹平板法和稀释平板法分离细菌有何异同点?布置学生课堂检测。课堂检测：独立完成。课后：布置课外作

4、业及下一节预习提纲。（见导学案）学生完成课外作业及下一节预习。板书设计教学札记三、其他补充教学资料（各位教师根据各班教学特点选择补充资料，可另附纸）1．微生物的分离与纯化：(1)实验原理：微生物的分离与纯化就是将待检测微生物样品通过划线或涂布接种在固体培养基上，样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个茵落接种到斜面培养基上，经培养后，即可得到一个微生物的纯种。(2)材料用具：培养16～24h的大肠杆菌(E．coli)培养液、灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面和平板、盛有9mL无菌水的试管、无菌玻璃涂棒、无

5、菌吸管、接种环等。(3)方法步骤：微生物的分离包括样品稀释、划线或涂布及培养三个步骤。①稀释：用1mL无菌吸管吸取1mL大肠杆菌培养液，加入到盛有9mL无菌水的大试管中，充分混匀，然后用无菌吸管从此试管中吸取1mL加入另一支盛有9mL无菌水的试管中，混和均匀，依次类推制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6叫系列稀释度的大肠杆菌稀释液(如下图)。②划线或涂布：平板划线分离法——在近火焰处，左手拿皿底，右手拿接种环，挑取大肠杆菌培养液一环在平板上划线，常用的划线方法有平行划线和连续划线两种(如下图)。

6、平行划线时，每转一个角度烧一次接种环。划线完毕后，盖上培养皿盖，做好标记。涂抹平板分离法——取3个平板，底面分别用记号笔写上10-4、10-5和10-6叫三种稀释度，然后用无菌吸管分别吸取相应稀释度的稀释液各0．1mL，放人已标记好的平板上，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻地涂布均匀，室温下静置5～10min，使菌液吸附进培养基(如下图)。问题讨论]问题1：如何判断选择培养基是否起到了选择作用?提示：制备牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，将稀释相同倍数菌液分别涂布在牛肉膏蛋白胨和选择培养基上，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长菌落数目明

7、显多于选择培养基上的数目，用来判断选择培养基起到了选择作用。问题2：以尿素作为惟一氮源培养基，是否意味在这个选择培养基上生长都是分解尿素微生物?如何进行验证?提示：以尿素作为惟一氮源培养基，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长，但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题。有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此，能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需的微生物。在以尿素为惟一氮源培养中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红，我们就可以准确地鉴定该种细菌能够分解尿素。因细菌合成的脲酶将

8、尿素分解成氨，氨会使培养基碱性增强，pH升高。问题3：两位同学用稀释涂抹平板法测定同一土壤样品中细菌数，在对应稀释倍数为10。培养基中，第一位同学在该浓度涂布一个平板，统计的菌落数为230；第二位同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21、212和256。该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果