实验一 紫外可见光光度法测定苯甲酸.doc

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1、实验一紫外可见光光度法测定苯甲酸一、实验目的1、了解紫外可见光光度计的使用方法2、掌握紫外光谱法测定苯甲酸的基本原理二、方法原理当辐射能（光）通过吸光物质时，物质的分子对辐射能选择性的吸收而得到的光谱称为分子吸收光谱，分子吸收光谱的产生与物质分子结构、物质所处的状态，溶剂和溶液的ph等因素有关。分子吸收光谱的强度与吸光物质的浓度有关。表示物质对光的吸收程度，通常采用“吸光度”这一概念来量度。根据朗伯—比尔定律，在一定条件下，吸光物质的吸光度与物质的浓度成正比。即A(吸光度）=εLCε——摩尔吸光系数L——溶层的厚

2、度C——物质的浓度因此，只要选择一定的波长测定溶液的吸光度，即可求出该溶液浓度，这就是UV-VIS分光光度法的基本原理。在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，因此，采用紫外光度计测定苯甲酸在紫外光区的吸收光谱并能进行定量分析。三、仪器与主要试剂紫外可见光光度计，1cm石英比色皿。0.1mol/LNaOH,0.01mol/LNaOH;苯甲酸（AR)四、实验步骤1、苯甲酸标准溶液制备称取苯甲酸（105℃烘干）250mg，用0.1mol/LNaOH溶液100ml溶解后，转入1000ml容量瓶中，蒸馏水

3、稀释至刻度。此溶液1ml含0.25mg苯甲酸。2、苯甲酸系列标准溶液的配制：分别取苯甲酸标准置备溶液配制成5μg/ml,10μg/ml,15μg/ml,20μg/ml,25μg/ml溶液，用0.01mol/mlNaOH稀释至刻度，摇匀。3、苯甲酸吸收曲线的绘制：以0.01mol/LNaOH为参比，在200~380nm范围内测绘出苯甲酸的吸收曲线，确定其最大吸收波长λmax。4、苯甲酸标准曲线的绘制：以0.01mol/LNaOH为参比，在波长λmax处分别测定步骤2中配制的5个苯甲酸标准溶液的吸光度值，记录数据，并

4、以浓度与吸光度绘制标准曲线。5、未知溶液的测定：取未知液，在波长λmax测定吸光度，通过标准溶液计算其含量。五、数据处理1、绘制苯甲酸在波长λmax的标准曲线。2、计算未知液中苯甲酸的浓度。浓度μg/ml510152025未知吸光度0.3390.6701.0321.4101.7021.29818.85μg/ml五、思考题1、本实验为什么要用石英比色皿？答：石英的透紫外的玻璃的不透过2、如何选择双波长法的测定波长？答：测定波长选择方法：样品在该波长λ1处有最大吸收.