国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc

国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc

ID:56732291

大小:401.00 KB

页数:19页

时间:2020-07-06

国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc_第1页
国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc_第2页
国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc_第3页
国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc_第4页
国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc_第5页
资源描述:

《国际协调会非灭菌产品微生物检查.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库

1、.非灭菌产品微生物检查:微生物计数法(ICH)概述本检查法可用于好氧的嗜温细菌和真菌的计数。当本检查法用于确定非规定灭菌制剂及其原、辅料是否符合相应的微生物限度标准时,按下列规定进行检验,包括其取样量和结果判断等。本检查法不适用于以活菌作为活性成分的制剂的微生物限度检查。本检查法可采用替代的微生物计数方法,包括自动测定方法,但必须验证替代方法优于或与药典方法相当。一般程序本检查应在严格避免外来微生物污染供试品的实验条件下进行,防止微生物污染的措施不得影响供试品中污染微生物的检出如果供试品具有抗菌活性,应尽可能

2、去除或中和。供试品检查时,如果使用了灭活剂,应对其有效性及对微生物的无毒性进行验证。如果在供试液制备时使用了表面活性剂,应验证其对微生物无毒性及与灭活剂的相容性。计数方法检查时可采用薄膜过滤法或下列平板计数法中的一种。最大可能数法(Most-Probabl-Number,MPN)用于微生物计数其精确度较低,但当供试品的微生物污染程度极低时,MPN法可能是最适宜的方法。检查时根据供试品的特性和其微生物限度标准选择计数方法。该方法应满足所用的供试品检验量足以符合试验结果的判断。供试品计数方法的适用性必须确定。培养

3、基促生长试验验和计数方法适用性确定试验总则供试品中污染的微生物计数方法的适用性应进行确认。若检验程序或供试品发生变化可能影响检验结果时,计数方法的适用性应重新进行确认。菌液制备试验菌液可用标准稳定的菌悬液(商品化)或按下列规定程序制备。试验菌应采用适宜的保存技术保存,试验所用的菌株传代次数不得超过5代(从菌种保存中心获得的菌种为第0代)。各试验菌株的培养及接种量见表1。使用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或者pH7.2磷酸盐缓冲液制备菌悬液,黑曲霉孢..子悬液可用含0.05%(v/v)聚山梨酯80的缓冲液。

4、菌悬液应在2小时使用,若保存在2~8℃的菌悬液可以在24小时使用。相对体积的黑曲霉和枯草芽孢杆菌的稳定孢子悬液可替代新鲜的孢子悬液,稳定孢子悬液可保存在2~8℃,并在验证过的贮存期使用。表1实验用菌液的制备和使用培养基促生长实验计数方法适用性实验实验菌株菌液制备需氧菌总数测定霉菌及酵母菌总数测定需氧菌总数测定霉菌及酵母菌总数测定金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)〔CMCC(B)26003〕胰酪胨大豆琼脂或胰酪胨大豆肉汤,30~35℃培养18~24小时胰酪胨大豆琼脂和胰酪胨大豆肉汤≤10

5、0cfu30~35℃,≤3天胰酪胨大豆琼脂/MPN胰酪胨大豆肉汤≤100cfu30~35℃,≤3天铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)〔CMCC(B)10104〕胰酪胨大豆琼脂或胰酪胨大豆肉汤,30~35℃培养18~24小时胰酪胨大豆琼脂和胰酪胨大豆肉汤≤100cfu30~35℃,≤3天胰酪胨大豆琼脂/MPN胰酪胨大豆肉汤≤100cfu30~35℃,≤3天枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)〔CMCC(B)63501〕胰酪胨大豆琼脂或胰酪胨大豆肉汤,30~35℃培养18~24

6、小时胰酪胨大豆琼脂和胰酪胨大豆肉汤≤100cfu30~35℃,≤3天胰酪胨大豆琼脂/MPN胰酪胨大豆肉汤≤100cfu30~35℃,≤3天白色念珠菌(Candidaalbicans)〔CMCC(F)98001〕沙氏葡萄糖琼脂或沙氏葡萄糖肉汤,20~25℃培养2~3天胰酪胨大豆琼脂≤100cfu30~35℃,≤5天沙氏葡萄糖琼脂≤100cfu20~25℃,≤5天胰酪胨大豆琼脂≤100cfu30~35℃,≤5天不采用MPN法沙氏葡萄糖琼脂≤100cfu20~25℃,≤5天黑曲霉(Aspergillusniger)

7、〔CMCC(F)98003〕沙氏葡萄糖琼脂或马铃薯葡萄糖琼脂,20~25℃培养5~7天,或直到大量孢子产生胰酪胨大豆琼脂≤100cfu30~35℃,≤5天沙氏葡萄糖琼脂≤100cfu20~25℃,≤5天胰酪胨大豆琼脂≤100cfu30~35℃,≤5天不采用MPN法沙氏葡萄糖琼脂≤100cfu20~25℃,≤5天阴性对照试验为确认实验条件是否符合要求,应设立阴性对照组,以稀释剂代替供试品,阴性对照组应无菌生长。培养基促生长实验每批成品培养基、由脱水培养基或按培养基处方配制的培养基应进行培养基促生长试验。接种如表

8、1所示的少量微生物(≤100cfu)至胰酪胨大豆肉汤管或胰酪胨大豆琼脂平板,每一批培养基分别制备一管/皿;接种如表1所示的少量微生物(≤100cfu)至沙氏葡萄糖琼脂平板,每一批培养基分别制备一皿,按表1所列条件培养。对于固体培养基,从被测试培养基获得的菌落数不得大于或小于来自验证过的标准培养基菌落数的2倍,并且其新鲜培养物的菌落形态应与之前验证过的标准培养基上的菌落形态一致;对于液体培养基,被测试

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。