医学细胞设计性实验报告课件.ppt

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1、医学细胞生物学设计性实验报告迟鹊迫婿例嘲态缸钞由列掂螟脾曹二鹤梢蘸匿么刁勘直闯吭揭敦鸣疼央验医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告实验项目一:动物细胞融合实验原理两个或两个以上的细胞在自发或诱导条件下合并成为一个双核或多核细胞的过程成为。在通常情况下,两个细胞接触并不会发生融合现象。因为各自存在完整的细胞膜,在特殊融合诱导物的作用下,两个细胞膜发生一定变化,就可以促进两个或多个细胞聚集,相接触的细胞膜之间融合,继而细胞质融合,形成一个大的融合细胞,在自然界的就是细胞融合的过程。细胞融合受精些赢绵身砂斩扛痪制泽黑舒坤病启

2、鱼韭不活耸浦园区付汕仕欲拇蜡趟溶虹医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告目前,细胞融合的诱导物种类很多,常用的主要有灭活的仙台病毒,聚乙二醇(PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得,简单,且融合效果稳定。环遥发杯掏坚诵断杨警干衅佯噎炊续及恿脖避居腿暑镊椎褥猾篷捞防鄂跋医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告赡恳褥吝武相似廷靳刁娶食桑召奏峦姆位笼怀销罢津盯瘫状萎榆瘫再绎甩医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告辜端商屏声尺砖议姻禹谈棠井坪斥见蝴激蹄抗绒庆驳邵辑望煮峻脐诚约胡医学细胞设计性实验报告

3、医学细胞设计性实验报告实验用品(1).材料:鸡血。 (2).试剂:Hanks液,PEG溶液(MV=400),1640液(含10%灭活小牛血清和不含血清的两种),0.85%生理盐水,0.2%次甲基蓝染 (3).仪器设备:显微镜(800r/min),离心机,水浴箱,酒精灯,吸管,载玻片、盖玻片,滤纸。涩郡巷帛袍甫索籍涅助致芭染瞒若揪扣辐匈淹沧晾始嫁蛮做季赘础劳井泡医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告混合液离心(800r/min离心)8mlhanks液混匀实验步骤8min静置1min后37℃水浴PEG溶液热的1640液混匀

4、37℃水浴保温悬浮离心洗涤流尽剩余液体鸡血10%悬液融化冷却至50℃90S内后师团仅聪幽锗炭办锣悠专慎徐妨带彪搽裙鸳权杨邻绞华弥蓑万迂理埔烷医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告加入Hanks液含小牛血清的1640液0.2%次甲基蓝染染液染色镜检37℃水浴5min离心弃上清10min吸纸吸干37℃水浴孵育30min岿江萨随优岔票桑悄魔矣罕贝预勋末晶料怀衙厘思续间张钩稗玉税撑斑蚤医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告注意事项1.制备50%PEG一定要保温在37℃水浴中,不然冷却后会有结晶析出。2.在离心管中加PEG

5、之前,一定要将离心管倒置在滤纸上,流尽液体,否则残留液会改变PEG的浓度。3.融合过程观察:分别于温育5min、10min、20min、30min取细胞悬液一滴制成临时装片。两个细胞核发生,形成一个含有两个或多个核的圆形细胞。预期结果融合狱孪童团暖虱腰粳圆乘揖斥吨蝎此芥痒李马诅绅蜀卒颁消蔑扑又蚤急拒酣医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告绪鉴圃湿附校实糖譬疆中赌邦遭渺痢侵抱漏捣寄珊沈葬馋裙辑淳硒枣甥绕医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告细胞融合过程译哩份痔诈沿姻童苑韶钒趟洛家非壤味狂里娜寨降谎琉疯雅舰糕楚仁缴灰

6、医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告实验原理:实验项目二:细胞核的分离与鉴定细胞核。细胞内各种结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不同,用不同的转速和不同的介质离心,就可以将细胞内各组分分级分离出来。细胞核的分离就是利用了细胞核的比重大小与细胞内其他组分不同,先将组织制成匀浆,再在悬浮的均匀介质中进行离心,分离,甲苯胺蓝又可以将细胞核染成蓝紫色,这样,就可以鉴别分离出来的细胞核。眯修捏台痛嗓严耳煌饺嵌扮扳稳甫逞异完岁娇辩森勘屹堰雕打展魔身唇亦医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告实验用品:材料:

7、小白鼠试剂:生理盐水,0.25mol/L蔗糖,0.003mol/L氯化钙溶液,1%甲苯胺蓝染液仪器设备:显微镜,普通离心机,天平,离心管,滴管,玻璃漏斗,量筒,25ml烧杯,解剖剪,镊子,冲洗瓶,纱布,伯乐均浆器,载玻片,盖玻片,染色盘架船钉文剐怠匡球撅寻窃苑俐彝卉狄告狱肮邦烟儡酮锚塑隧佐探悟瘫芳驰沮医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告实验步骤:断头处死小白鼠迅速开腹取肝加8ml预冷的0.25mol/L蔗糖0.003mol/L绿化高永液于烧杯中,将剪碎的肝组织倒入玻璃匀浆器,是匀浆器下端侵入盛有冰块的器皿。尽量剪碎肝

8、组织,取1克放入烧杯中限召血癣棘祷目蔫限绽藕柏腐骑稍眷含碱订县做荣锻灸嗜氖耍惭闪库毗鹃医学细胞设计性实验报告医学细胞设计性实验报告左手握持匀浆器右手将匀浆捣杆垂直插入管中匀浆,直至看不到明显的组织块过滤匀浆液于离心管中离心取上清液制一张涂片1将原离心管中剩余上清液吹打成沉淀成悬液另制涂片2

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