水稻花粉镜检.doc

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1、水稻花粉镜检通过花粉活力的测定，可以了解花粉的可育性，并掌握不育花粉的形态和生理特征。在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中，常涉及花粉活力鉴定。掌握花粉活力的快速测定方法，是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。　　Ⅰ、碘-碘化钾染色法   多数植物正常花粉呈规则形状，如圆球形或椭球形、多面体等，并积累淀粉较多，通常I2-KI可将其染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或积累淀粉较少，用I2-KI染色，往往呈现黄褐色。因此，可用I2-KI溶液染色法测定花粉活力。　　一、仪器、药品与材料　　（一）实验材料   各种

2、着生花芽的植物枝条，花芽要充分发育并已含苞待放。　　（二）仪器与用品   显微镜，恒温箱，镊子，载玻片，盖玻片。　　（三）试剂   I2-KI溶液：取2gKI溶于5~10mL蒸馏水中，然后加入1gI2，待全部溶解后，再加蒸馏水定容至300mL。贮于棕色瓶中备用。　　二、实验步骤   1．花粉采集：取充分成熟将要开花的花蕾，剥除花被片等，取出花药。   2．镜检：取一花药置于载玻片上，加1滴蒸馏水，用镊子将花药充分捣碎，使花粉粒释放，再加1~2滴I2-KI溶液，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察。凡被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒，呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。观察2~3

3、张装片，每片取5个视野，统计花粉的染色率，以染色率表示花粉的育性。    注：此法不能准确表示花粉的活力，也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。因为核期退化的花粉已有淀粉积累，遇I2-KI呈蓝色反应。另外，含有淀粉而被杀死的花粒遇I2-KI也呈蓝色。