实验3.1血液凝固及其影响因素.pdf

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1、清华大学2011夏季学期专业实践综合训练实验3.1血液凝固及其影响因素一、实验目的1.了解血液凝固的基本过程。2.测定加速及延缓血液凝固的各种物理和化学因素。二、实验原理血液流出血管后会很快凝固，血液凝固是指血液由流动的液体变为不能流动的凝胶状台地过程，其实质是血液中的可溶性纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白的过程；纤维蛋白交织成网，把血细胞及血液的其他成分网罗在内，从而形成血凝块。血液凝固的过程可分为三个阶段：第一阶段是凝血酶原激活物的形成，第二阶段是凝血酶的形成，第三阶段是纤维蛋白的生成。三个阶段的实

2、质是由凝血因子按一定的顺序相继激活而生成的凝血酶最终使可溶性纤维蛋白原变成不溶性的纤维蛋白。凝血系统包括内源性和外源性两套凝血系统。内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液，通常因血液与带负电荷的衣物表面接触而被启动。外源性凝血途径是由来自血液之外的组织因子与血液接触而启动的凝血过程。内源性与外源性凝血系统的区别是：外源性凝血系统所需的凝血因子的种类及凝血步骤较少，因此血液凝固的时间短，而内源性凝血系统的血液凝固时间长。本试验在暴露血管的条件下直接从动物动脉取血，观察记录不同实验条件下血液凝固的时间

3、，通过加入外源性的组织因子来观察外源性凝血系统的作用，比较内源性与外源性凝血系统血液凝固过程的不同，并进一步比较影响血液凝固的各种物理及化学作用。三、实验用品家兔，哺乳动物手术器械一套，小试管11支，带橡皮条的玻璃棒，小烧杯两只，试管架，秒表13个，0.1%的肝素，2%草酸钾，7%枸缘酸钠，8%的Cacl2溶液，细玻璃粉，石蜡油，冰块。四、实验方法和步骤1、备好11支干洁试管和2只小烧杯。2、麻醉家兔，进行动脉插管。取一只家兔，从一侧耳缘静脉缓慢注入25%氨基甲酸乙酯（4ml/kg体重），待其麻醉后，背

4、位固定于手术台上，距喉头1~2cm起，之胸骨上端1~2cm止，做一5~7厘米长的正中皮肤切口，钝性分离皮下组织和肌肉，实施气管插管。然后，暴露一侧颈总动脉，于近心端加清华大学2011夏季学期专业实践综合训练一动脉夹，然后结扎其远心端，动脉夹与结扎线之间的距离应达到3cm。在结扎线和动脉夹之间做一楔形切口，向心脏方向插入动脉插管至动脉夹，用细线在动脉壁外将动脉插管扎紧，注意应使动脉插管壁的内外涂满肝素，需要放血时，开启动脉血管夹即可。3、血液凝固的加速和延缓观察。取11个干燥的小试管，标号，然后按照表中的

5、准备各种不同的实验条件。第一试管血液凝固的记录方法是：自血液柳树动脉插管时开始计时，在干燥、室温的情况下保持静止不动，直到管中的血液不再流动为止。记录此时间为1号试管血液凝固的时间，也即为此家兔的凝固时间。第二只至第11只试管血液凝固的时间的记录方法是：自血液流出动脉插管时记录时间，每隔15秒钟，轻轻倾斜试管一次，观察液面是否倾斜，直到管中的血液不再流动为止。记录这个时间，为此试管血液的凝固时间。以第二管血液的凝固时间为对照，其他各管凝固所需时间与第二管血液的凝固时间比较，判断血液凝固是加速还是延缓了，

6、并分析其原因。4、观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用。取2个干燥的烧杯，标号，在两个烧杯内分别加入3ml血液，其中一杯静止不动，作为对照，另一杯则用粗糙的试管刷搅拌血液半分钟后，取出竹签，用生理盐水洗去血细胞，观察缠绕在试管刷上的纤维蛋白，观察并比较两个烧杯里的血液有何区别？分别将鸽子血液凝固的实践记录在表中。五、实验记录试管号实验条件凝固时间1干燥、室温、凝固过程中避免震荡3分30秒2干燥、室温、凝固过程中每15秒倾斜试管一次4分16秒3干燥、加温（40℃水浴），凝固过程中每15秒倾斜试管一次7分36秒

7、4干燥、降温（0℃水浴），凝固过程中每15秒倾斜试管一次>30分（无凝结现象）试5干燥、加细玻璃粉，凝固过程中每15秒倾斜试管一次6分0秒管6加石腊油，凝固过程中每15秒倾斜试管一次6分45秒组7加草酸钾，凝固过程中每15秒倾斜试管一次>30分（无凝结现象）8加7%枸椽酸钠，凝固过程中每15秒倾斜试管一次>30分（无凝结现象）9加1毫升8%CaCl2，凝固过程中每15秒倾斜试管一次23分10秒10加0.1%肝素0.1ml，凝固过程中每15秒倾斜试管一次>30分（无凝结现象）11先加草酸钾，待第二只试管血

8、液凝固后，加8%CaCl2，并开始计时>30分（无凝结现象）清华大学2011夏季学期专业实践综合训练1干燥、室温、凝固过程避免震荡>30分（无凝结现象）烧>30分（无凝结现象），杯2用试管刷不断搅拌试管刷上有白色丝状组物六、数据分析试管号实验条件凝固时间预期结果实验结果1干燥、室温、凝固过程中避免震荡3分30秒正常凝固正常凝固干燥、室温、凝固过程中每15秒倾斜试延缓凝固延缓凝固24分16秒管一次干燥、加温（40℃水浴），凝固过程中每延缓凝固