行业标准：GBT 28091-2011 剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法.pdf

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1、ICS65．020．01B16a雪中华人民共和国国家标准GB／T28091m2011剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法DetectionandidentificationofXiphinemaspp．asvirusvectors2011—12-30发布2012-06-01实施宰瞀鳃紫瓣訾麟瞥星发布中国国家标准化管理委员会“”。刖罱GB／T28091—2011本标准按照GB／T1．1—2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC／TC271)提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、浙江大学和珠

2、海市质量计量监督检测所。本标准主要起草人：张卫东、郑经武、廖力、蒋立琴、张燕、郭恺、陈其文、乐海洋、徐森锋、迟远丽、吴长坤、彭仁。1范围剑线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法本标准规定了剑线虫属传毒种类的检疫鉴定方法。本标准适用于植物根系、土壤及栽培介质中剑线虫属传毒种类的检疫鉴定。2规范性引用文件GB／T28091—2011下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB／T24830拟毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法sN／T1

3、157进出境植物苗木检疫规程SN／T1158进出境植物盆景检疫规程3剑线虫属(传毒种类)基本信息中文名：剑线虫属(传毒种类)。学名：Xiphinemaapp．。英文名：virusvectorsspeciesofDaggernematode。剑线虫属传毒种类隶属于线虫门Nematoda(Rudolphi，1808)Lankester，1877、无侧尾腺纲Ade—nophoreaLinstow，1905、矛线目DorylaimidaPearse，1942、长针线虫科Longidoridae(Thorne，1935)Filipjev，1934

4、剑线虫属XiphinemaCobb，1913。剑线虫传毒种类是植物根系的迁移性外寄生线虫，主要依靠土壤、介质土和带根苗木、球茎等寄主植物材料的调运传播。剑线虫属(传毒种类)的其他信息参见附录A。4方法原理将现场检疫中发现的介质土、土壤以及植株，送实验室经漏斗法或浅盘法分离获得线虫，制成临时或永久玻片，显微镜下对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并测量数据，依据本标准描述的剑线虫属传毒种类形态鉴定特征与其基本生物学信息，按系统分类学方法，鉴定其生物学种类。5仪器和用具仪器和用具按GB／T24830执行。6试剂试剂按GB／T24830执行，分样筛

5、选用300目。GBIT28091—20117现场检测对苗木、球茎等寄主材料进行检查，注意观察苗木的生长状况、根部为害状，以及是否带介质、土壤等。重点选取植株矮化、萎缩，根部肿大、粗短、畸形，侧根丛生等症状的苗木及根际介质或土壤，如无可疑症状则按要求随机取样。取样后立即置密封塑料袋，标记后及时送实验室检测。具体抽样比例按sN／T1157和SN／T1158执行。8实验室检测8．1线虫分离线虫分离按GB／T24830执行。8．2体视显微镜镜检分离获得的水样在10倍以上体视显微镜检查，观察线虫的形态结构。8．3标本制作标本制作按GB／T2483

6、0执行。8．4生物显微镜观察、摄影和测量应针对雌、雄虫主要鉴定特征仔细观察并显微摄影，重点包括整体形态、头区轮廓、齿尖针、尾部形态、雌虫生殖系统及雄虫交合刺等，并在每张图片上加相应标尺，测量并计算a．b、c和y等值。9形态鉴定特征9．1剑线虫属形态鉴定特征9．I．I雌虫虫体细长，热杀死后虫体直或腹弯或呈⋯C形、开螺旋形。头部圆、连续或缢缩；侧器口宽裂缝状，侧器囊倒马镫形或漏斗形；齿尖针细长、针状、高度硬化，齿尖针基部呈叉状，齿托基部呈显著的凸缘状；齿针导环为双环、后环高度硬化，导环位于齿尖针后部靠近齿尖针与齿托相连接处；背食道腺核位于背

7、食道腺开口附近、大于腹亚侧腺核。雌虫生殖腺有4种类型：前后生殖腺均发育完全的双生殖腺型、前生殖腺退化但结构尚完整的双生殖腺型、前生殖腺退化且结构不完全的假单生殖腺型和无前生殖腺的单生殖腺型等，有些种类的子宫内有骨化结构。尾部形态多样：短、半球形、有或无1个指状尾突，圆锥形，前部圆锥形后部渐变细成丝状等。9．I．2雄虫雄虫(有些种至今未发现)体长、形态、头部、口针、食道和尾形的特征均似雌虫，双生殖腺、对伸，交合刺矛线型、粗壮、有侧附导片，斜纹交配肌发达、由泄殖腔向前延伸，泄殖腔区有1对交配乳突，其前一段距离有1列腹中交配乳突(最多7个)。

8、9．2剑线虫属传毒种类的形态鉴定特征剑线虫属传毒种类形态鉴定特征参见附录B和附录C。29．2．1美洲剑线虫(x．americanumCobb，1913)GB／T2809l一2011雌虫虫体细长(1_4mm～