体液免疫球蛋白测定讲课教案.ppt

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1、第十六章体液免疫球蛋白测定P188湖南省中医药大学微生物免疫教研室李志芳抗体（antibody,Ab)：是B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的能与相应抗原特异性地结合球蛋白。(生物学功能上的概念)抗体主要存在于血清等体液中，故将抗体介导的免疫称为体液免疫。几个概念免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。（化学结构上的概念）Ab与Ig的联系1.所有的Ab都是Ig2.Ig并非都是Ab分泌型（secretedIg，sIg）：存在于血清等体液中，如Ab膜型（membraneIg，mIg）是B细胞上的抗原受体。Ig的基

2、本结构：四肽链结构,所有Ig的基本单位都是四条肽链的对称结构。两条重链（H）和两条轻链（L）。每条重链和轻链分为氨基端和羧基端。免疫球蛋白分类及特性重链性质，Ig分5类：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、IgD(δ)、IgE(ε)轻链性质，Ig分2型：κ、λIg占血浆蛋白总量：20%Ig含量：血清IgG、IgA、IgM：g/L、IgD、IgE：mg/L体液IgG、IgA、IgM：mg/L检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病五类免疫球蛋白的特点和功能第一节体液中IgG、IgA、IgM测定的临床应用体液免疫球蛋白测定主要指对人体的血液、尿液、脑脊液等样本中的

3、IgG、IgA、IgM定量检测，由于免疫球蛋白IgG、IgA、IgM在人体体液中含量相对较高，测定快速，临床意义明确，临床应用较广泛IgG是血清中含量最高(占80%)的免疫球蛋白，是血液和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。IgA分为血清型A1和分泌型A2，是参与黏膜局部免疫的主要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体。测定方法单向环状免疫扩散法(耗时、重复性差)免疫浊度法（速率散射比浊）常用年龄：血液Ig随年龄、性

4、别、血型、种族及测定方法不同有所差别，各实验室要建立自己的参考范围一、血液免疫球蛋白测定的临床意义高Ig血症多克隆Ig增高（感染）单克隆Ig增高（免疫增殖病）低Ig血症:先天性低Ig血症（免疫缺陷病）获得性低Ig血症(蛋白丢失、淋巴系统肿瘤、使用免疫抑制剂)正常人尿液中的Ig含量甚微，当机体的免疫功能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损，从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增多。二、尿液免疫球蛋白测定的临床意义判断肾小球滤膜受损程度：选择性蛋白尿指数SPI可根据尿内Ig增高的类型帮助鉴别诊断肾小球疾病的种类尿中游离轻链的检测对

5、诊断轻链病和MM有重要意义三、脑脊液免疫球蛋白测定的临床意义生理情况下，Ig根据其分子量大小，通过血脑屏障的难易度不同，IgG、IgA、IgM在脑脊液中的浓度递减。病理状态时，血脑屏障通透性增加，脑脊液组分发生改变。血脑屏障受损程度：白蛋白商值、CSF-IgG指数增高有临床意义：多发性硬化症、中枢神经系统感染第二节血液IgD和IgE的测定及临床应用正常人血液中IgD含量很低（0.2%），目前生物学功能尚不清楚IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，引起I型超敏反应；与机体抗寄生虫免疫也可能有关。一、IgD的测定及

6、临床意义测定方法：放免、免疫比浊、ELISA(常用)临床意义：血液中含量波动范围大，各实验室最好使用固定的试剂盒，建立自己的参考范围二、IgE的测定及临床意义测定方法：总IgE测定：放射免疫分析法化学发光免疫分析法(常用)免疫比浊法酶联免疫吸附法(常用)特异性IgE测定：免疫斑点法酶联免疫吸附法临床意义：增高：变态反应性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫性疾病。降低：意义不大第三节血清IgG亚类测定及临床意义Ig亚类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降测定方法：单向免疫扩散法免疫比浊法（常用）放射免疫分析法酶联免疫吸附法（常用）临床意义：Ig

7、G亚类可能和感染复发、免疫缺陷和自身免疫性疾病有关，因而测定IgG亚类对上述疾病有重要意义。即使当总IgG水平在正常范围内，IgG的亚类分配也可能发生紊乱第四节M蛋白测定及临床意义M蛋白：B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等M蛋白测定蛋白区带电泳：经典方法计算蛋白含量和百分比免疫比浊法：免疫球蛋白定量准确性高、快速免疫电泳：M蛋白分型免疫固定电泳：M蛋白分型及鉴定，分辨率高(最常用)各方法视具体情况合理选用蛋白质区带电泳是血清蛋白的经典分

8、析方法，血