荧光定量PCR仪使用说明(简化版).doc

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1、7500荧光定量PCR仪使用说明注意事项:实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用,凸盖PCR管禁止使用。使用8联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撑,以防止板槽受力不均。实验数据用光盘刻录,禁止U盘拷取,数据可暂存于本机电脑硬盘中,各实验室D盘中有指定文件夹,中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。操作步骤Ø开机依次打开电脑显示屏、主机,输入开机密码7500,待电脑启动稳定后,按压7500仪器电源按扭,等待仪器启动(约30s)Ø放入反应板当仪器只显示Powe

2、r状态指示灯时,打开托盘,方入反应板,关闭托盘(右上方45度角用力推压托盘右侧的圆形凹槽)。Ø创建反应板文件1.打开SDS软件,在对话框中选择CreateNewDocument,或选择菜单栏File>New;2.从Assay下拉列表中选择反应板类型;3.为反应板文件命名,单击Next4.选择要添加到反应板文件的探针(引物),单击Add添加选中探针(如果在列表中未列出所需探针,单击NewDetector创建新探针)5.单击NextØ为每个反应孔指定探针和任务1.选取探针相同的反应孔,点击反应孔对应的探针。2.单击Task栏的下边指定探针任务,选

3、择Use(使用)。3.单击Finish(完成)。Ø为反应孔设置样品名选取反应孔,直接输入相应样品名(也可右键,调出反WellInspector对话框,在SampleName中进行修改)Ø设定PCR循环参数、运行程序1.选择Instrument选项卡,默认条件下显示标准PCR条件,可跟据实验情况修改;2.单击AddDissociationStage添加溶解曲线循环;3.修改PCR反应体积;4.将反应板文件保存至指定路径。5.点击Start运行程序Ø结束实验1.实验结束后关闭软件。(确认反应板文件数据已保存)2.打开拖盘,将反应板取出,关闭拖盘。

4、3.按下7500仪器电源开关关闭机器。4.关闭电脑及显示屏。5.登记仪器使用情况。请严格按照仪器使用说明进行操作,如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责人朱晓苏,电话,实验室3506。谢谢配合!!唐仲英血液学研究中心2009年10月29日

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