刺五加多向耐药性转运蛋白基因的克隆及其表达对皂苷含量的影响.pdf

《刺五加多向耐药性转运蛋白基因的克隆及其表达对皂苷含量的影响.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、浙江农业学报ActaAgricuhuraeZhejiangensis，2014，26(2)：351—355．http：／／www．zjnyxb．cn邢朝斌，孟春燕，修乐山，等．刺五加多向耐药性转运蛋白基因的克隆及其表达对皂苷含量的影响[J]．浙江农业学报，2014，26(2)：351—355．DOI：10．3969／j．issn．1004—1524．2014．02．18刺五加多向耐药性转运蛋白基因的克隆及其表达对皂苷含量的影响邢朝斌，孟春燕，修乐山，劳风云，庄鹏宇，柴丽花(河北联合大学生命科学学院，河北唐山063000；2河北联合大学公共卫生学院，河北唐山063000；。河北联合大学药学

2、院，河北唐山063000)摘要：利用简并引物进行聚合酶链式反应(PCR)扩增获得长度为693bp的刺五加(Eleutherococcussentt‘cosus)多向耐药性(pleiotropicdrugresistance，PDR)转运蛋白基因，GenBank登录号为KCA73536，其编码的231个氨基酸的蛋白属于PDR转运蛋白的核苷酸结合结构域。氨基酸序列与毛果杨(Populustrichocarpa)、蓖麻(Ricinuscommunis)和水稻(Oryzasativa)的PDR氨基酸序列一致性分别为88．74％，90．04％和88．31％。RT—PCR法检测PDR在刺五加不同生长

3、发育时期和不同器官中表达情况和分光光度法测定刺五加总皂苷含量的结果显示：刺五加PD基因在整个生长期中均有表达，与皂苷在整个生长期中均有合成的特点相符，但两者的相关性未达显著水平。JPDR基因在叶片和叶柄中高表达的特点与刺五加皂苷仅存在于叶中的特点相符，两者间存在显著的正相关关系(P<0．05)。关键词：刺五加；多向耐药性转运蛋白；克隆；表达分析；皂苷中图分类号：S567文献标志码：A文章编号：1004．1524(2014)02-0351-05CloningofpleiotropicdrugresistancetransportergenefromEleutherococcussentic

4、osusandefectOfitsexpressiononsaponinscontentXINGZhao—bin，MENGChun—yan，XIULe—shan，LAOFeng-yun，ZHUANGPeng—yu，CHAILi．hua(CollegeofLifeScience，HebeiUnitedUniversity，Tangshan063000，China；CollegeofPublicHealth，HebeiUnitedUniversity，Tangshan063000，China；CollegeofPharmacy，HebeiUnitedUniversity，Tangshan06

5、3000，China)Abstract：cDNAencodingpleiotropicdrugresistance(PDR)gene，whoselengthwas693bp，wasamplifiedfromEleutherococcussenticosus，bymeansofpolymerasechainreaction(PCR)withdegenerateoligonucleotideprimers，thegenehasbeendepositedinGenBankunderaccessionnumberKC473536．Itencodedaproteinof231aminoacidsb

6、elongingtoPDR’Snucleotidebindingdomain．IncomparisonwithE．senticosusPDRwiththoseofPopulustrichocarpa，RicinuscommunisandOryzasativaontheaminoacidsequence，theaminoacidhomologywas88．74％，90．04％and88．31％．Theexpressionof尸DRindifferentorgansofE．senticosusinvariousgrowingperiodswasdetectedbyRT·PCR，andE．se

7、nticosussaponinscontentwasmeasuredbyspectrophotometrymethod，theresultsshowedthatPDRgeneexpressedinthewholegrowingperiodsofE．senticosus．whichwasconsistentwiththe收稿日期：2013-04．17基金项目：国家自然科学基金项目(30701086)；河北省自然科学基金项目(C2009