儿童急性淋巴细胞白血病中BAFF、APRIL及其受体的表达研究.pdf

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1、·950·中国免疫学杂志2014年第3O卷doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2014．07．019儿童急性淋巴细胞白血病中BAFF、APRIL及其受体的表达研究①吴利辉孙宝兰②③徐美玉②宋红花③顾健辉③杨治平③倪红兵③(南京医科大学附属南京儿童医院，南京210008)中图分类号R733．71文献标志码A文章编号1000484x(2014)07-0950-06[摘要]目的：探讨B淋巴细胞刺激因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)及其受体在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及意义。方法：培养ALL细胞株Raji和REH细胞，采用Rea

2、lTime-PCR及ELISA、Westernblot检测BAFF、APRIL及其受体mRNA及蛋白表达；运用荧光免疫细胞化学法和流式细胞术(FCM)鉴定BAFF、APRIL蛋白在Raji和REH细胞的定位与表达；同时运用RT．PCR和ELISA方法检测不同治疗阶段(初发20例，缓解23例)ALL患儿和健康对照儿童(15例)各指标mRNA和血浆蛋白水平，并分析BAFF、APRIL血浆蛋白水平和主要临床指标之间的相关性。结果：各指标mRNA和蛋白在ALL细胞株中均有表达，BAFF和APRIL蛋白定位于细胞膜上，FCM检测其阳性细胞比例及平均荧光强度比对照组明显升高(P

3、<0．05)；初发ALL儿童血浆BAFF、APRIL及其受体mRNA和蛋白水平比健康儿童显著升高(P

4、生作用。[关键词]儿童急性淋巴细胞白血病；B淋巴细胞刺激因子；增殖诱导配体ExpressionandsignificanceofBAFF／APRILinchildhoodacutelymphoblasticleu-kemiawuLi—Hui，SUNBao—Lan，XUMei—Yu，SONGHong-Hua，GUJian—Hui，YANGZhi—P，NIHong—Bing．NanjingChildrensHospitalAffiliatedtoNanjingMedicalUniversity，Ⅳnng210008，China[Abstract]Objective：To

5、investigatetheexpressionandsignificanceofBcellactivatingfactor(BAFF)andaproliferation—inducingligand(APRIL)inchildrenwithacutelymphoblasticleukemia(ALL)．Methods：ThemRNAandproteinexpressionsinALLcellslinesRajiandREHwereexaminedbyReal—TimequantitativePCR(RT—PCR)，ELISAandWesternblotmethod

6、s．ImmunoeytochemistrywasusedtoobservethelocationofBAFFandAPRILinALLcelllines．Thepercentageofpositivecellsandmeanfluorescenceintensitywereevaluatedbytechniqueofflowcytometry．Meanwhile，wedetectedthemRNAandproteinlevelsofBAFF／APRILandtheirreceptorsin43childrenwithALL(20newlydiagnosedpatie

7、nts，23remissionpatients)and15casesofcontrolgroupbyELISAandRT—PCRfollowinganalysistherelationshipbetweenBAFF／APRILandmainclinicalparametersofALLchildren．Results：BothmRNAandproteinexpressionsofBAFFandAPRILandtheirreceptorsexpressedinRajiandREHcells．Immunocytofluorescencestainingshowedt