抗鹅α干扰素单克隆抗体的制备及初步鉴定.pdf

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1、第30卷第10期中国预防兽医学报Vo1．30．NO．102008年1O月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine0ct．2008抗鹅0(干扰素单克隆抗体的制备及初步鉴定呼鑫鑫，王君伟’(东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030)摘要：以含有鹅0【干扰素(IVN一0【)基因的真核表达载体pcDNA3．1．GolFN．免疫BALB／c鼠，采用杂交瘤技术制备抗鹅0【干扰素单克隆抗体(McAb)，并对其部分生物学特性进行初步研究。实验获得2株抗鹅IFN一的单克隆抗体。经鉴定，Ig亚类均为IgM，轻链为K链；腹水效价均达到10以上；Wes

2、ternblot证实2株McAb均能与重组IFN．d发生反应，出现特异性条带；其中一株单抗能与鹅脾细胞诱导产生的天然干扰素反应；杂交瘤细胞株连续传20代以上及冻存后复苏，细胞生长良好，效价稳定。抗鹅IFN．单克隆抗体的制备，为研究和检测IFN．提供了一种重要的手段，并为其在免疫机制研究、免疫功能检测、纯化1FN．Of．等领域提供了广泛的应用价值。关键词：重组鹅13~干扰素；鹅天然干扰素；单克隆抗体中图分类号：$858．33；S852．42文献标识码：A文章编号：1008．0589(2008)10．0820—04一Preparat‘ionand‘C_nraCt1en0ZatIilOnOT

3、rmOn0c。lonalIantibodyagainstinterferonOLofgooseHUXin—xin，WANGJun—wei(CollegeofAnimalMedicine，NortheastAgnculturalUniversity，Harbin150030，China)Abstract：Toproducemonoclonalantibody(McAb)againstgooseinterferonOr．，BALB／cmicewereimmunizedwiththerecombinantplasmidpcDNA3．1-GolFN一0【．Spleencellswerecoll

4、ectedandhybridomacellswereobtainedbyfusingtheimmunespleencellswithSP2／0cells．Twohybridomaclonessecretingantibodyagainstinterferonwereobtained．BothMcAbbelongedtoIgMsubclasswithKchainandhaveanasciticELISAtitreupto10．WesternblotanalysisshowedthatbothMcAbreactedwithrecombinantIFN—dprotein，andoneMcAb

5、reactedwithnativeinterferon．TheMcAbdevelopedinthisstudycouldserveasimportanttoolinstudyinterferonOtandthefunctionsofin'lrflunecellsandimnluneregulation．Keywords：recombinantgooseinterferon；goosenatualinterferon；monoclonalantibody干扰素(Interferon，IVY)是病毒或干扰素诱生剂病毒繁殖、抗细胞分裂增殖及调节机体免疫等基本进入机体诱导宿主细胞产生的一类糖蛋

6、白，具有抗功能。自从1957英国学者Isaacs和Lindenmann首*Correspondingauthor收稿日期：2008—04—08基金项目：黑龙江省留学回国基金项目(LC02C08)作者简介：呼鑫鑫(1981～)，女，黑龙江密山人，硕士研究生，主要从事免疫学研究通讯作者：E-mail：jwwang@neau．edu．ca＼Ie-、阶石石-、石石e石、石e石．、、、thresholdforhumanBcellactivationviatheantigenreceptorofantibodytohumanimmunodeficiencyvirusenvelope：DNAcomp

7、lexisreduceduponCO—ligationoftheantigenreceptorwithvaccinationwithgpl20一C3dfusionproteins[J】．AIDSResearchCD21(CR2)[J】lJImmunol，1997，159(8)：3782—3791．andHumanRetroviruses，2001，17(9)：829—835．[23】RossTM，XuY，GreenTD，eta1．Enhance